7.常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差.科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母.请分析回答下列问题:

(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染.
(2)取从自然界中采集的葡萄,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养.

图乙是经过图甲过程A纯化培养的结果,在培养基上接种时划线的顺序依次是①③②(用编号表示),研究者在图甲过程C的操作培养中,得到一个培养后菌落分布如图丙所示的平板,推测接种时可能的操作失败是涂布不均匀.
(3)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵.从存活的酵母菌中提取DNA,经大量扩增获得目的基因.
(4)将目的基因连接到质粒上,该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因,将重组质粒导入酵母菌时,应选择缺乏尿嘧啶合成能力的酿酒酵母作为受体菌.
(5)将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试.随着发酵的持续进行,若该酿酒酵母能够存活,说明他能利用葡萄糖和木糖产生酒精,且对酒精的耐受能力强(合理即可),即所需菌株培育成功.
6.烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物.临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验.实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性.
(1)获取绿脓杆菌单菌落:配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有碳源、氮源、生长因子、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却至50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板.经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落.
(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释,用涂布平板法法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板.将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈,这说明绿脓杆菌对上述抗生素敏感;含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱;含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:一是杂菌污染,二是抗比阿培南的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落.
(3)根据上述实验结果,为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好应选用抗生素美罗培南.
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