11.卡那霉素能引起野生型苎植株(2N)黄化,育种专家向里生型苎麻的核基因组中随机插入已知序列的sDNA片段(含卡那霉素抗性基因),通过筛选得到突变体Y,sDNA片段的插入使基因A的功能丧失,从突变体的表现型可以推测野生型基因A的功能.
(1)野生型苎麻的核基因组插入已知序列的sDNA片段引起的变异类型属于基因突变(基因突变/染色体变异).
(2)将突变体自交所结的种用子75%酒精消毒处理30s后,接种在含有卡那霉素的培养基中,实验设置3个重复组,在适宜条件下光照培养.一段时间后若培养基上有绿色有幼苗,则可确定苎麻植株的DNA中含有sDNA片段或卡那霉素抗性基因,实验设置3个重复的目的是排除实验偶然性.
(3)统计培养基中突变体Y自交产生大量后代,绿色幼苗和黄色幼苗性状分离比例接近于1:1,突变型(A+)对野生型(A)显性(显性/隐性),自交结果不符合(符合/不符合)孟德尔自交实验的比例.
(4)育种专家进一步设计杂交实验以检测变体Y(突变基因为A+)产生的,实验内容及结果如表.
由实验结果可知,X片段插入引起的变异会导致雄配子致死,进而推测基因A的功能与雄配子正常发育有关.
(1)野生型苎麻的核基因组插入已知序列的sDNA片段引起的变异类型属于基因突变(基因突变/染色体变异).
(2)将突变体自交所结的种用子75%酒精消毒处理30s后,接种在含有卡那霉素的培养基中,实验设置3个重复组,在适宜条件下光照培养.一段时间后若培养基上有绿色有幼苗,则可确定苎麻植株的DNA中含有sDNA片段或卡那霉素抗性基因,实验设置3个重复的目的是排除实验偶然性.
(3)统计培养基中突变体Y自交产生大量后代,绿色幼苗和黄色幼苗性状分离比例接近于1:1,突变型(A+)对野生型(A)显性(显性/隐性),自交结果不符合(符合/不符合)孟德尔自交实验的比例.
(4)育种专家进一步设计杂交实验以检测变体Y(突变基因为A+)产生的,实验内容及结果如表.
| 杂交亲本 | 实验结果 |
| 突变体Y(♀)×野生型(♂) | 绿色:黄色=1:1 |
| 突变体Y(♂)×野生型(♀) | 黄色 |
9.受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶(PPO)和底物(酚类物质)直接接触,引起马铃薯的褐变,为探究温度对PPO活性的影响,实验小组进行如下实验:
(1)PPO粗提液的提取低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液(PH值为5.5)的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液,加缓冲液研磨的目的是防止酚氧化酶(PPO)失活
(2)不同温度下PPO活性的测定
(注:反应底物充足,实验结果中“+”越多褐色越深)
①实验步骤顺序有不妥之处,请改正“反应”步骤改在“温度预处理”之后.
②实验结果表明:15℃和30℃温度条件,PPO具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是在酶的最适温度前后,可以有相同的催化效率.
③为进一步探究PPO最适温度,应在15℃-30℃范围内设置温度梯度.
0 132867 132875 132881 132885 132891 132893 132897 132903 132905 132911 132917 132921 132923 132927 132933 132935 132941 132945 132947 132951 132953 132957 132959 132961 132962 132963 132965 132966 132967 132969 132971 132975 132977 132981 132983 132987 132993 132995 133001 133005 133007 133011 133017 133023 133025 133031 133035 133037 133043 133047 133053 133061 170175
(1)PPO粗提液的提取低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液(PH值为5.5)的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液,加缓冲液研磨的目的是防止酚氧化酶(PPO)失活
(2)不同温度下PPO活性的测定
| 步骤顺序 | 试管 1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | 试管5 | 试管6 | 试管7 | 试管8 |
| PPO粗提液 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | ||||
| 酚类底物 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | ||||
| 反应 | 混合振荡 | 混合振荡 | 混合振荡 | 混合振荡 | ||||
| 温度预处理 | 0℃ | 15℃ | 30℃ | 45℃ | ||||
| 保温时间 | 5min | 5min | 5min | 5min | ||||
| 记录结果 | + | ++++ | ++++ | ++ | ||||
①实验步骤顺序有不妥之处,请改正“反应”步骤改在“温度预处理”之后.
②实验结果表明:15℃和30℃温度条件,PPO具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是在酶的最适温度前后,可以有相同的催化效率.
③为进一步探究PPO最适温度,应在15℃-30℃范围内设置温度梯度.