8.埃博拉出血热是一种由埃博拉病毒引起的急性传染病,建立良好特异性的检测方法非常重要.埃博拉病毒核蛋白NP具有很强的抗原性,是诊断研究的重要靶点.
(1)鼠源抗NP蛋白的单克隆杭体,由鼠杂交瘤细胞分泌,抗体结构如图1所示,抗体通过可变区与抗原特异性结合.从鼠杂交瘤细胞中提取RNA,逆转录合成cDNA,利用PCR技术扩增鼠源抗体可变区对应的DNA片段.
使用限制酶和DNA连接酶将鼠源抗体可变区对应的DNA片段与能表达人源抗体恒定区部分的载体重组,导入人胚肾上皮细胞,从细胞培养液中获取人-鼠嵌合抗体.临床使用人-鼠嵌合抗体的优点是降低免疫排斥反应.
(2)提取埃博拉病毒的蛋白质进行电泳,并运用抗原-抗体杂交,检测人-鼠嵌合抗体的特异性.实验主要步骤如图2所示,其中一抗能与相应抗原特异性结合,二抗能与相应一抗特异性结合.

注:1、2为电泳泳道,其中1为蛋白质分子量标准,2为提取的埃博拉病毒蛋白质;标记二抗的AP能在显色液中显色.A、B、C为不同一抗、二抗处理后的三组实验结果.
组別一抗来源二抗来源结果
人-鼠嵌合抗体AP标记的抗人抗体
鼠杂交瘤细胞上清液AP标记的抗鼠抗体
普通人胚肾上皮细胞培养液AP标记的抗人抗体
实验记录如上表,AP标记的抗人抗体能与嵌合抗体中的人源恒定区结合,AP标记的抗鼠抗体能与鼠源抗体结合.若表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ依次对应结果分析中的A、B、C(一种方案即可),则表明该人-鼠嵌合抗体能用于埃博拉出血热的应急血清学检测.
7.研究表明,嫁接会影响砧木和接穗(嫁接到砧木上的芽、枝等)的性状.为研究嫁接后mRNA转运的机理,科研人员进行了如下实验.
(l)嫁接后,在接穗与砧木的接合部分形成愈伤组织,使接合部位的伤口愈合,这时通过细胞分裂和分化形成新的组织,使接穗和砧木问的韧皮部上下连通.
(2)为研究梨属特异性Pb基因转录出的mRNA(简称PbmRNA)在侧枝中的运输,科研人员以杜梨为材料进行实验,处理方法及实验结果如图1所示.

①科研人员将枝条的树皮(含韧皮部)进行环剥,同时要去除两道环剥间的所有叶片,去除叶片的目的是避免PbmRNA运输到叶片对实验结果产生干扰或避免叶片产生PbmRNA对实验结果产生干扰.
②由实验结果可知,在环剥当日,第1、2、3 枝段的韧皮部存在PhmRNA.环剥后第2天和第4天,第3和第2枝段的PbmRNA依次消失.随着环剥口的愈合,至环剥后第22天、第32天,第2和3枝段的PbmRNA依次出现.据此推测,PbmRNA在韧皮部中的运输方向是由第1枝段依次向2、3枝段运输.
(3)为进一步研究砧木和接穗间mRNA的传递规律,科研人员将取自鸭梨的接穗嫁接到杜梨上,嫁接后第2、3、7天分别提取接穗部位和砧木部位细胞的总mRNA,经逆转录获得cDNA,PCR扩增后,用特定的限制酶处理,电泳检测得到图2所示结果.实验结果说明mRNA可在砧木和接穗之间双向传递.
(4)为了验证上述结论,科研人员利用以下三种烟草作为实验材料,进行嫁接实验,检测接穗和砧木韧皮部的PbmRNA含量.请写出实验组应选用的砧木和接穗.
实验材料:野生型烟草、转入Ph基因的转基因烟草、转入空载体的转基因烟草实验组:一组砧木用野生型烟草,接穗用转入Pb基因的转基因烟草;另一组砧木用转入Pb基因的转基因烟草,接穗用野生型烟草.
 0  128004  128012  128018  128022  128028  128030  128034  128040  128042  128048  128054  128058  128060  128064  128070  128072  128078  128082  128084  128088  128090  128094  128096  128098  128099  128100  128102  128103  128104  128106  128108  128112  128114  128118  128120  128124  128130  128132  128138  128142  128144  128148  128154  128160  128162  128168  128172  128174  128180  128184  128190  128198  170175 

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