14.B淋巴细胞瘤是一种恶性肿瘤,用常规手段治疗时,会损伤大量的正常组织细胞,因此探索高效的治疗手段已成为肿瘤治疗领域需要迫切解决的热点问题.
(1)B淋巴细胞瘤产生的根本原因原癌基因与抑癌基因突变.体内一旦出现肿瘤细胞,正常机体通过细胞免疫,发挥了免疫系统的监控和清除功能,从而避免人体患病.但由于各种原因,导致肿瘤细胞表面抗原表达量减少,无法被免疫系统识别,从而成功躲避攻击,得以快速增殖.
(2)实验证实,CD19是B淋巴细胞瘤中特异性表达的一种抗原,在少数正常细胞,如B细胞、浆细胞中也有少量表达;CD28、CD137可激活T细胞,使其恢复增殖和抗肿瘤能力.科研人员利用了在动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术获得的CD19单克隆抗体,进而与CD28、CD137组成嵌合抗原受体(CAR),其结构如图所示.请预测CAR在免疫应答中的优势:既可识别并结合肿瘤抗原又能激活T细胞,使其具有増殖和抗肿瘤能力.

(3)利用DNA连接酶将控制CD19单抗、CD28、CD137等合成的相关基因构建成嵌合基因,然后将嵌合基因与作为运载体的修饰过的病毒结合,导入到T细胞并整合到细胞核中的染色体DNA上,检测到目的(嵌合)基因表达后,培养获得了大量的含嵌合抗原受体的T细胞(CAR-T).
(4)对CAR-T的抗肿瘤效果进行检测.
实验步骤具体操作
第一步取40只生理状态基本相同的裸鼠(无胸腺),通过外科手术将体积相同的恶性B淋巴瘤组织埋在裸鼠的直肠处,并将上述裸鼠随机均分为A、B、C、D四组.
第二步A组:注射lmL磷酸盐缓冲液(PBS);
B组:注射                    ;
C组:注射lmL含有T细胞(仅转入空载体)的PBS;
D组(实验组):注射                     .
第三步每5天测量肿瘤体枳,共观测30天,对观察结果进行记录.
①选取裸鼠的原因是裸鼠无胸腺,缺少T细胞,避免排异反应对实验干扰;避免自身T细胞杀伤肿瘤细胞.
②B组注射1mL含有正常T细胞的PBS,D组注射等量1mL含有CAR-T的PBS.
③通过对实验结果的观测,证实了CAR-T细胞对小鼠体内的肿瘤生长有明显抑制作用,那么试推测相应的实验结果是怎样的?D组肿瘤体积明显小于A、B、C组.
(5)你认为将CAR-T用于人类肿瘤治疗,可能存在的风险是CAR-T对某些正常组织(B细胞或浆细胞)表达的抗原进行免疫应答、载体插入到正常基因组中引起变异.
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