20.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动,具体步骤如下.
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10g.剪碎后分成两组,一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h.
DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液,充分研磨.用两层纱布过滤,取滤液备用.
第二步:先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上.
第三步:取6支试管,分别加入等量的质量浓度为2mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物.
DNA检测:在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果(如表).
材料保存温度花菜辣椒蒜黄
20℃++++++
-20℃+++++++++
注:(“+”越多表示颜色越深)
分析上述实验过程,回答下面的问题.
(1)该探究性实验的课题名称是:探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响.
(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少DNA断裂.
(3)表中的颜色为蓝色,颜色的深浅代表了DNA含量的多少.
(4)DNA检测时需沸水浴中加热的目的是加速颜色反应,同时说明DNA对高温有较强的耐受性.
(5)根据实验结果,得出结论并分析.
①结论1:与20℃相比,相同实验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量较多.
结论2:等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多.
②针对结论1,请提出合理的解释:低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢.
(6)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小.为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出.
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