探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数。

实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。

材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。

方法步骤：

（1）倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在_________________________操作。

（2）制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液 1 mL，转至9 mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰 cm处。

（3）涂布。按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布3个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布 个平板。

（4）培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3～4d。一般每隔24h统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止 。

（5）细菌的计数。选取菌落数在30～300的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌株数是 。（稀释度是105）

（6）预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数 （填“多于”或“少于”）无氮培养基上的数目。理由是_____________________________________________________________（2分）。

纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题。

（1）纤维素酶是由3种组分组成的复合酶，其中的____________酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。

（2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于 。

A．③ B．①② C．②③ D．①②③

（3）乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，宜采用______________法接种。

与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是_________________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低，原因是____________。

（4）为了保持所获得菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，将菌种接种在___________培养基上，放人4℃冰箱中可保藏3～6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的________混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

下图是菊花茎尖离体培养示意图，据图回答下列问题：

（1）图中B是_______。菊花茎尖培养成植物体的根本原因是________________________。

（2）植物组织培养常用MS培养基，大量元素有________________________，配制母液时应浓缩______倍。

（3）生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，为促进愈伤组织的形成，两者的使用方法是________________________________________________________________________。

（4）菊花茎尖消毒所用的试剂是体积分数为____________和质量分数为______________。

在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作中，用到的微生物分别是（ ）

A．酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌

B．酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌

C．毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌

D．酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌

在果酒制作过程中，下列哪项操作会引起发酵液受污染（ ）

A． 榨汁机用热水进行清洗，并晾干

B． 发酵瓶先用温水清洗，再用75%的酒精擦拭后晾干使用

C． 葡萄先去除枝梗，再冲洗多次

D． 每次排气时，只需拧松盖，不能将盖完全揭开

在一普通锥形瓶中，加入含有酵母菌的葡萄糖溶液，如下面左图，在右图的相关坐标曲线图中，正确的是（ ）

A．①②③ B．②③④

C．①③④ D．①②④

下列关于腐乳制作过程中的操作，不正确的是（ ）

A．先将豆腐切成块放在消毒的笼屉中，保持温度在15～18℃，并具有一定湿度

B．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口铺面的盐要铺厚一些

C．卤汤中酒的含量一般控制在12％左右

D．卤汤中香辛料越多，口味越好

下图装置可用于生物技术实践的相关实验，有关叙述不正确的是（ ）

A．两种装置都可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作

B．利用装置甲制作腐乳时，应随着豆腐块层数的加高而增加盐量

C．用装置乙制作果酒时温度应控制在30℃左右，制作果醋时应适当降温

D．装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，可防止空气中微生物的污染

下列关于果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程的叙述正确的是（ ）

A．发酵菌群均为原核细胞 B．均需高温高压灭菌

C．均可以使用自然菌种 D．均需控制无氧条件

在泡菜的制作过程中，下列有关叙述中，不正确的是 （ ）

A．按照清水与盐的质量比为5：1的比例配制盐水

B．乳酸菌的代谢类型为异养厌氧型

C．盐水入坛前要煮沸冷却，以防污染

D．在坛盖边沿的水槽中要注满水，以保证坛内的无氧环境