4.现有两种淀粉酶A与B,某生物兴趣小组为探究不同温度条件下这两种淀粉酶的活性,设计如下实验.
实验原理:温度等条件可以影响酶的活性;淀粉在淀粉酶的催化作用下分解成麦芽糖;用分光光度计测量溶液的吸光度时,物质含量越多,其吸光度越大,因此可测出物质的相对含量.
实验材料:一定浓度的淀粉溶液、相同浓度的淀粉酶A和淀粉酶B溶液、水浴缸、温度计等.
实验过程如表所示:
步骤            组别12345678
Ⅰ.设置水浴缸温度/℃2030405020304050
Ⅱ.取8支试管各加入等量淀粉溶液(mL),分别保温5min1010101010101010
Ⅲ.另取8支试管各加入等量淀粉酶溶液,分别保温5min酶A酶A酶A酶A酶B酶B酶B酶B
Ⅳ.将相同温度两个试管中的淀粉溶液与淀粉酶溶液混合摇匀,保温5min
实验结果:用分光光度计对各组淀粉含量进行检测,结果如图所示.

(1)细胞中酶的作用机理是降低化学反应的活化能,合成酶的场所是核糖体和细胞核.
(2)该实验的自变量是温度、酶的种类,无关变量有溶液的量、反应时间、pH等(至少写出2种).
(3)根据实验结果分析,下列叙述正确的是C
A.酶A在20℃条件时活性较高
B.酶A的活性一定小于酶B的活性
C.酶B在40℃条件时活性较高
D.大于50℃条件时,酶A完全失活
(4)此实验用分光光度计检测底物淀粉的剩余量来表示酶的活性,能不能用斐林试剂检测生成物麦芽糖的含量来表示酶的活性?不能.原因是斐林试剂检测时需水浴加热,会导致反应体系温度发生改变,影响实验结果.
(5)若要进一步探究酶B的最适温度,实验设计的主要思路应是在30~50℃之间设立较小温度梯度的分组实验,按上述步骤进行实验,分析结果得出结论.
2.内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽.内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应.ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究奠定基础.其过程如图(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为CTCGAG).请分析回答:

(1)完成过程①需要的酶是逆转录酶;该酶催化的底物是脱氧核苷酸;
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使磷酸二酯键断开,形成的黏性末端是.用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是防止质粒自身环化.
(3)过程④中需要DNA连接酶,去构建重组质粒.过程⑥中,要用Ca2+预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态.
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是检测ETA基因能否表达.
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加.美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释原因:ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成.
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