7.chlL基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因.为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失chlL基因的变异株细胞.构建过程如下:

第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出chlL基因片段.
第②步:将chlL基因与质粒构建形成重组质粒1.
第③步:将重组质粒1中chlL基因中部0.8kb片段删除,用一段红霉素抗性基因取代之,得到重组质粒2.
第④步:将重组质粒2导入蓝藻细胞,由于改造后的基因与chlL基因仍有很长的序列相同,所以能准确地与其发生同源重组,产生出缺失chlL基因的突变株.
请根据上述资料,回答下列问题:
(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶?TaqDNA聚合酶.PCR扩增DNA时必须加入引物,引物的化学本质是一小段DNA或RNA.
(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环,每次循环都要经过三个步骤,其中“复性”这一步骤发生的变化是引物通过碱基互补配对与DNA模板链结合.
(3)构建重组质粒1、2时,为保证成功率,往往使用同一种限制酶对基因和质粒进行切割,以切出相同的黏性末端,便于连接.此酶的作用是将DNA分子的磷酸二酯键打开.
(4)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用红霉素抗性基因制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入红霉素可将变异株细胞筛选出来.
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