15.萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α淀粉酶和β淀粉酶.α淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下时迅速失活,而β淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活.
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).
主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、质量分数为5%的淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等.
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖梯度液.取7支干净的具塞刻度试管,编号,按下表所示加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按试管号顺序排列.
试剂麦芽糖标准液(mL)蒸馏水(mL)斐林试剂
(mL)
试管号102.02.0
20.21.82.0
30.61.42.0
41.01.02.0
51.4X2.0
61.6Y2.0
72.0Z2.0
步骤二:利用萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液.
步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷却.
步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL质量分数为5%的淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min.
步骤五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入到E、F试管中,然后向E、F试管中分别加入2mL斐林试剂,60℃水浴加热2min后,观察颜色变化.
结果分析:将E试管中的颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖的浓度,并计算出α淀粉酶催化效率.请回答下列有关问题.
(1)本实验的目的是测定小麦种子中α淀粉酶催化效率.
(2)步骤一的5~7号试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是0.6、0.4、0 (单位:mL).
(3)实验中B试管所起的具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖.
(4)请补全步骤五的做法.
(5)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤三进行改变.
 0  123880  123888  123894  123898  123904  123906  123910  123916  123918  123924  123930  123934  123936  123940  123946  123948  123954  123958  123960  123964  123966  123970  123972  123974  123975  123976  123978  123979  123980  123982  123984  123988  123990  123994  123996  124000  124006  124008  124014  124018  124020  124024  124030  124036  124038  124044  124048  124050  124056  124060  124066  124074  170175 

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