质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。某细菌质粒上的标记基因如右图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上生长情况也不同，下图示外源基因在质粒中可插入的位置有a、b、c点。

某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析，其中分析正确的是

天然的玫瑰没有蓝色花，人们首先研究清楚了三色紫罗兰的蓝色素基因序列，并利用农杆菌成功培育了转基因蓝玫瑰。下列叙述错误的是

A．可用化学方法合成蓝色素基因

B．一般根据蓝色素基因表达结果筛选导入目的基因的农杆菌

C．重组质粒首先进入农杆菌，然后再进入玫瑰细胞

D．转基因蓝玫瑰的培育过程需运用植物组织培养技术

下图为果酒和果醋的制作流程，回答问题：

（1）清洗葡萄时应特别注意不能反复冲洗，以防止 。

（2）从自然菌样中筛选较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用 方法接种，接种之前要对接种工具进行 ，避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。

（3）果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制在 。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是 和温度控制住30～35℃。写出由果酒酿制成果醋过程的总反应式： 。

（4）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌 （填“能”或“不能”）将果汁中的糖发酵为醋酸，理由。 。

（5）在用果汁制果酒的过程中，发酵瓶溶液中pH的变化是 。

A．增大 B．不变 C．减小 D．先碱小后增大

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前、后，分别含有 、 个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是 。

（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。

（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶，若两两相连，则连接产物中有哪几种情况? 。

（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

（轮状病毒（RV）是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一，其主要感染小肠上皮细胞，从而造成细胞损伤，引起腹泻。有专家指出物质X可以预防轮状病毒感染，为了验证物质X的作用，研究者计划用新生小白鼠做实验。

实验材料：生长发育状况相同的健康的出生3天的小白鼠30只。试验前大便轮状病毒检测为阴性。RV来源：RV流行高峰期腹泻患儿。（注：给药方式和给药剂量不作具体要求。）

实验思路如下：

①取生长发育状况相同的健康的小白鼠30只，随机分成数量相等的三组，分别编号为甲、乙、丙。

② ，乙组和丙组每只小白鼠注射等量的生理盐水。

③将甲、乙、丙三组小白鼠置于相同且适宜的条件下饲养。一段时间后， ，丙组不作处理。

④将甲、乙、丙三组小白鼠置于相同且适宜的条件下饲养。一段时间后，观察并记录小白鼠的患病情况，统计并分析各组小白鼠的患病率。

（1）完善上述实验思路。

（2）请设计一张用于记录实验结果的表格。（注：表格用于记录每组的发病情况等，不记个体；表格名称不作要求）

（3）请预测实验结果并得出结论：

Ⅰ．转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

（1）在对猪纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的 ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换培养液，防止 对细胞自身造成危害。

（2）筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的 。

（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集 ，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入 中，再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

（4）为了提高重组胚胎的利用率，可对处于 阶段的胚胎进行均等分割，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地，代孕母猪需要用激素处理处理，促使其 以利于受孕。

Ⅱ．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答：

（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有

（至少答2种）。

（2）可用 法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中，要在 旁进行操作，接种后的培养皿 于37℃的 中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，若培养基中存在分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的 使PH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力 。

下列关于细胞的组成成分和结构的叙述中，正确的是

A．维生素D和性激素都属于脂肪类物质

B．细胞合成的激素、抗体和神经递质发挥作用后都会失活

C．蓝藻的内质网参与了蛋白质的加工

D．细胞核是DNA和RNA储存和复制的主要场所

下列有关生物科学史的叙述中，正确的是

A．赫尔希和蔡斯用同位素标记法证明了蛋白质不是遗传物质

B．孟德尔运用假说—演绎法揭示了分离定律和自由组合定律的实质

C．萨顿利用类比推理法证明了基因在染色体上呈线性排列

D．沃森和克里克运用了构建物理模型的方法研究DNA分子的结构