2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家.绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光.这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况.帮助推——青夏教育精英家教网—

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

(1)图中通过过程①②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

______________________________________________________________________

②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来________，理由是：__________________________________________________。

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用的方法_____________。

(3)GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是__________________。

如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是避免器官移植发生________反应。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：________(用数字表示)。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白

如下图所示，请据图回答下面的问题。

(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能 “融合”在一起，说明细胞膜[__________________________。此过程，常用__________________作为诱导剂，该细胞的特点是___________________________________________。

(2)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同

_____________________________________________________________________。

(3)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了______________________________________________。

(4)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的__________________和__________________两大技术。

人的血清白蛋白(HSA)有许多作用，如对血液中的免疫球蛋白(抗体)有保护和稳定的作用。如果免疫球蛋白缺少了这种保护，免疫力就会变得不稳定，容易引起各种疾病，所以在临床上需求量很大。白蛋白通常从人血中提取，产量受到限制。如果应用基因工程、克隆等技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解，请根据图解回答下列问题：

(1)在此工程过程中涉及的现代生物技术主要有____________________________。

(2)在基因工程中，我们称②为__________，在②进入③之前要用______________________________（工具）来构建基因表达载体。

(3)图中①一般经__________处理可以得到③。从③到④的过程中一般用未受精的卵细胞去核后作为受体，不用普通的体细胞，原因是__________________________。通过核移植技术能够得到胚胎④，精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎。在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括____________反应和___________反应。

(4)从A～D中选出④到⑤的过程中正确的操作方法______，把⑤送入⑥的最佳时期是____________________。