18.EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成.人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物.其过程如下:

请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到cDNA,再通过PCR技术获得大量EPO基因.
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射促性腺激素以排出更多的卵子,培养到减数第二次分裂中期时期与获能的精子相遇时,精子首先发生顶体反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精.
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中启动子能驱动基因的转录.
(4)采用显微注射技术技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养.培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质.
(5)当胚胎发育至桑椹胚或囊胚时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将内细胞团进行均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定.
(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用抗原-抗体杂交技术对血液来进行检测.
17.蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽,具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应.体外研究发现,蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用.请回答:

(1)在适宜条件下进行体外培养,癌细胞能够无限增殖,在此过程中细胞内的DNA含量将持续出现周期性的变化.图-1表示癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液中培养一定时间后,DNA含量不同的细胞数.据此推测,蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的间期.
(2)研究表明,阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡.科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制,进行了以下实验.请完善实验并回答问题.
方法步骤:
a.取4只相同的培养瓶,编号,分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞.
b.1号培养瓶为空白对照,向2-4号培养瓶中分别加入 2、4、8 μg/mL蜂毒素溶液.
c.培养48h后,检测并统计胃癌细胞凋亡率,结果如上图-2所示;
d.重复a、b步骤,检测凋亡基因(Bax、Bel-2)的表达,结果如上图-3所示.分析讨论:
I.图-2表明一定浓度的蜂毒素能诱导胃癌细胞凋亡,并随浓度增大诱导效应逐渐增强;
II.图-2、图-3表明:从基因水平上看,蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与Bax基因表达增强和Bel-2基因表达减弱(或Bax基因与Bel-2基因的表达;或促进Bax蛋白产生和抑制Bel-2蛋白产生)有关,
当Bel-2 蛋白/Bax蛋白的比值出现降低趋势时,将会诱导胃癌细胞凋亡.
 0  120780  120788  120794  120798  120804  120806  120810  120816  120818  120824  120830  120834  120836  120840  120846  120848  120854  120858  120860  120864  120866  120870  120872  120874  120875  120876  120878  120879  120880  120882  120884  120888  120890  120894  120896  120900  120906  120908  120914  120918  120920  120924  120930  120936  120938  120944  120948  120950  120956  120960  120966  120974  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网