18.如图一所示表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为
C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

(1)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为537、790、661. 若图左DNA分子中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共有2种不同长度的DNA片段.
(2)为了提高试验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有2n-2个.
(3)若将图中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是BamH1.
(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在含抗生素B的培养基上培养,得到如图二所示的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含抗生素A的培养基上培养,得到如图2的结果(空圈表示与图1对照无菌落的位置).挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落.
(5)若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为340.
 0  120687  120695  120701  120705  120711  120713  120717  120723  120725  120731  120737  120741  120743  120747  120753  120755  120761  120765  120767  120771  120773  120777  120779  120781  120782  120783  120785  120786  120787  120789  120791  120795  120797  120801  120803  120807  120813  120815  120821  120825  120827  120831  120837  120843  120845  120851  120855  120857  120863  120867  120873  120881  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网