20.人的血清白蛋白(HSA)有许多作用,如对血液中的免疫球蛋白(抗体)有保护和稳定的作用.如果免疫球蛋白缺少了这种保护,免疫力就会变得不稳定,容易引起各种疾病,所以在临床上需求量很大.白蛋白通常从人血中提取,产量受到限制.如果应用基因工程、克隆等技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能.如图1是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解,请根据图1解回答下列问题:

(1)在此工程过程中涉及的现代生物技术主要有核移植技术、动物细胞培养技术、转基因技术、胚胎移植.
(2)在基因工程中,我们称②为目的基因,在②进入③之前要用限制性内切酶、DNA连接酶、运载体(工具)来构建基因表达载体.
(3)图1中①一般经胰蛋白酶(胶原蛋白酶)处理可以得到③.从③到④的过程中一般用未受精的卵细胞去核后作为受体,不用普通的体细胞,原因是卵细胞大易操作、分化程度低,有促进体细胞细胞核表现出全能性的物质.通过核移植技术能够得到胚胎④,精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎.在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括透明带反应和卵细胞膜反应.
(4)如图2所示,从A~D中选出④到⑤的过程中正确的操作方法C,把⑤送入⑥的最佳时期是桑椹胚或囊胚期.

(5)⑦是⑥生出的后代,那么⑦的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似,为什么?因为个体⑦的核遗传物质大部分来自荷斯坦奶牛,⑥只是为胚胎发育提供营养和场所,⑦并没有获得⑥的遗传信息,如果②的数量太少常用PCR技术(技术)来扩增.
19.2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家.绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能.如图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

(1)图中通过过程①②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒.限制酶Ⅰ的识别序列和切点是
-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点.
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端.
②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来可以,理由是:因为形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的).
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用的方法显微注射法.
(3)GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是用于重组DNA的检测和鉴定(鉴定受体细胞中是否含有目的基因).
如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是避免器官移植发生免疫排斥反应.
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:②①③④(用数字表示).
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白.
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