13.下图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

(1)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为537、790、661. 若图左DNA分子中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共有2种不同长度的DNA片段.
(2)为了提高试验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有2n-2个.
(3)若将图中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是BamH1.

(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在含抗生素B的培养基上培养,得到如图示的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含抗生素A的培养基上培养,得到如图4的结果(空圈表示与图3对照无菌落的位置).挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落.
(5)若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为340.
 0  118144  118152  118158  118162  118168  118170  118174  118180  118182  118188  118194  118198  118200  118204  118210  118212  118218  118222  118224  118228  118230  118234  118236  118238  118239  118240  118242  118243  118244  118246  118248  118252  118254  118258  118260  118264  118270  118272  118278  118282  118284  118288  118294  118300  118302  118308  118312  118314  118320  118324  118330  118338  170175 

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