17.图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

(1)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为537、790、661. 若图1DNA分子中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共有2种不同长度的DNA片段.
(2)为了提高试验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有2n-2个.
(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是BamH1.
(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在含抗生素B的培养基上培养,得到如图2示的菌落.
再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含抗生素A的培养基上培养,得到如图4的结果(空圈表示与图3对照无菌落的位置).挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落.

(5)若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为340.
16.“探究”是高中生物学习的重要内容,是以设计实验和进行实验为核心的实践活动.请回答下列问题:
(1)探究酵母菌在氧气充足条件下不能进行酒精发酵的原因是氧气抑制了酵母菌的无氧呼吸,还是有氧呼吸产生的ATP抑制了酵母菌的无氧呼吸的实验:
材料用具:锥形瓶、含酵母菌的培养液(试剂1)、酵母菌破碎后经离心处理得到的只含有酵母菌细胞质基质的上清液(试剂2)和只含有酵母菌细胞器的沉淀物(试剂3)、质量分数5%的葡萄糖溶液、ATP溶液、蒸馏水、橡皮管夹若干、其他常用器材和试剂.

实验步骤:
①取锥形瓶等连接成如图1所示的装置三套,依次编号为A、B、C,设定A套为对照组.锥形瓶1中都加入等量的质量分数为10%的NaOH溶液,锥形瓶3中都加入等量的澄清的石灰水.
②A装置的锥形瓶2中加入10mL的试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL蒸馏水;B装置的锥形瓶2中加入10mL试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL ATP溶液; C装置的锥形瓶2中加入10mL试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL蒸馏水.
③A、B、C三套装置均先持续通入氮气1min,除去锥形瓶中的氧气,再将A、B、C三套装置分别作如下处理:A套持续通入氮气,B套持续通入氮气,C套持续通入空气.
④将三套装置放在相同且适宜条件下培养10h.
⑤观察澄清石灰水是否变浑浊,判断酵母菌是否进行无氧呼吸.
(2)探究二氯二乙胺能否抑制癌细胞增殖的实验:
材料用具:肝部长有肿瘤的小鼠,不同浓度的二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管等.
实验步骤:
a.取洁净的培养皿一个,加入适量培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用胰蛋白酶处理,使其分散开来,置于培养皿中培养;
b.取洁净的试管5支,加入等量培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入等量生理盐水;
c.从培养皿中吸取等量的培养液置于1~5号试管中,振荡后,在适宜条件下培养-段时间;
d.从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于血球计数板上,在显微镜下计数,记录数据.
实验分析:
①该实验的实验组是1~4号试管.上述实验步骤d中测量到的数据是否准确,请判断并作出解释:不准确,取样前培养液没有摇匀.
②另有同学按照正确的方法进行实验,得到如下结果:
根据以上实验结果,你能得出的结论有:二氯二乙胺能抑制癌细胞增殖,且在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强.
13.某种细菌体内某氨基酸(X)的生物合成途径如下:
底物$\stackrel{酶a}{→}$中间产物1$\stackrel{酶b}{→}$中间产物2$\stackrel{酶c}{→}$X
这种细菌的野生型能在基本培养基(满足野生型细菌生长的简单培养基)上生长,而由该种细菌野生型得到的两种突变型(甲、乙)都不能在基本培养基上生长;在基本培养基上若添加中间产物2,则甲、乙都能生长;若添加中间产物1,则乙能生长而甲不能生长.在基本培养基上添加少量的X,甲能积累中间产物1,而乙不能积累.请回答:
(1)根据上述资料可推论:甲中酶b的功能丧失;乙中酶a的功能丧失,甲和乙中酶c的功能都正常.由野生型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型的不同(同一、不同)菌体中的不同基因发生了突变,从而导致不同酶的功能丧失.如果想在基本培养基上添加少量的X来生产中间产物1,则应选用甲(野生型、甲、乙).
(2)将甲、乙混合接种于基本培养基上能长出少量菌落,再将这些菌落单个挑出分别接种在基本培养基上都不能生长.上述混合培养时乙首先形成菌落,其原因是甲产生的中间产物1供给乙,使乙能够合成X,保证自身生长产生菌落.
(3)在发酵过程中,菌体中X含量过高时,其合成速率下降.若要保持其合成速率,可采取的措施是改变菌体细胞膜的通透性,使X排出菌体外.
 0  117911  117919  117925  117929  117935  117937  117941  117947  117949  117955  117961  117965  117967  117971  117977  117979  117985  117989  117991  117995  117997  118001  118003  118005  118006  118007  118009  118010  118011  118013  118015  118019  118021  118025  118027  118031  118037  118039  118045  118049  118051  118055  118061  118067  118069  118075  118079  118081  118087  118091  118097  118105  170175 

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