5.利用农杆菌转化法,将抗逆基因转入至拟南芥(2n=10)中,获得不同株系的拟南芥.
(1)从农杆菌中获得带有潮霉素抗性基因(H基因)的Ti质粒,将抗逆基因插入到Ti质粒的T-DNA上,因Ti质粒上的此结构具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的特点.
(2)为确定不同拟南芥株系导入的基因在染色体上的相对位置,科研人员筛选并通过自交获得转基因成功的4个纯合株系:1、2、3、4,做了如下杂交实验.
①4个纯合株系植株分别与非转基因植株正、反交得F1,F1自交获得F2.F2中抗潮霉素性状与不抗潮霉素性状的植株比例为3:1,表明每个株系的H基因均位于一对同源染色体上的同一位点,但不能确定4个株系的H基因是否位于同一对同源染色体上.
②将上述4个纯合株系植株间进行配组形成6个杂交组合(1×2、1×3、1×4、2×3、2×4、3×4),每个组合得F1,F1自交获得F2
a.除2×4组合外,其它杂交组合F2中抗潮霉素性状与不抗潮霉素性状的植株比例均为15:1,表明1、2、3三个株系相比较,它们的H基因位于非同源染色体(同源染色体/非同源染色体)上.
b.2×4组合F2植株全表现抗潮霉素性状.假设株系1中H基因在染色体上的位置如图1所示,请推测株系2中H基因的位置和株系4中H基因的两种可能的位置(在图2中标注,竖线代表染色体,横线代表基因的位置).

c.根据上述实验推测,利用农杆菌转化法导入到拟南芥中的基因的插入位置是随机(随机/固定)的.
(3)潮霉素抗性可作为转基因植株后代具有抗逆基因的初步判断指标.实验中发现上述纯合株系自交后代的抗逆比例未达到100%,可能的原因是抗逆基因丢失或抗逆基因未表达.
 0  117856  117864  117870  117874  117880  117882  117886  117892  117894  117900  117906  117910  117912  117916  117922  117924  117930  117934  117936  117940  117942  117946  117948  117950  117951  117952  117954  117955  117956  117958  117960  117964  117966  117970  117972  117976  117982  117984  117990  117994  117996  118000  118006  118012  118014  118020  118024  118026  118032  118036  118042  118050  170175 

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