11.常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差.科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母.请分析回答下列问题:
(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是:防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染
(2)(3)(4).
(2)取从自然界中采集的葡萄,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养.

图乙是经过图甲过程A 纯化培养的结果,在培养基上接种时划线的顺序依次是①③②(用编号表示).研究者在图甲过程C 的操作培养过程中,得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板,推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀.

(3)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以木糖 为碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵.
(4)从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA,利用PCR 技术大量扩增获得目的基因.若将1个目的基因分子复制10 次,则需要在缓冲液中至少加入211-2个引物.将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上,然后将所得的重组质粒导入酵母菌时,应选择缺乏尿嘧啶合成 能力的酿酒酵母作为受体菌.
(5)将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含葡萄糖和木糖的培养基中进行酒精发酵能力测试.随着发酵的持续进行,若该酿酒酵母能够存活,说明它能利用葡萄糖和木糖产生酒精,且对酒精的难受能力强,即说明所需菌株培育成功.
8.内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系.研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达.其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为CTCGAG).据图回答下列问题:

(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是所有生物共用一套遗传密码.
(2)过程①中需要用逆转录酶处理,过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA形成的黏性末端是-AGCT(或).用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是使目的基因定向连接到载体上(避免目的基因及载体的任意连接).
(3)图中的基因表达载体至少还缺少终止子,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的ETA基因作探针.
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量.因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是检测ETA基因能否表达及表达量.
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素增加.美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,原因是ETA能与内皮素结合(减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合),从而抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成.
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