2.草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡.但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长.目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦.
取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是否成功还未知.图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点.据图回答下列问题:
限制酶MspⅠBamHⅠMboⅠSmpⅠ
酶切位点C↓CGG
GGC↑C
G↓GATCC
CCTAG↑G
↓GATC
CTAG↑
CCC↓GGG
GGG↑CCC
(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是ABCE.
(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入草甘膦.
(3)一个完整的基因表达载体除了具备复制原点、启动子和终止子外,还应包括标记基因和目的基因.
(4)若需利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是MspⅠ和SmaⅠ.
(5)通常用农杆菌转化法将EPSPS基因导入植物体内.假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因目的基因没有成功表达或表达的产物失活.
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