9．科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草．图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．请分析回答下列问题：

（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用PCR（聚合酶链式反应）技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是引物、酶、原料、模板，该技术必须用耐热的DNA聚合或热稳定性的DNA聚合酶；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有标记基因．
（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因．图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用BamHⅠ和HindⅢ酶对外源DNA、质粒进行切割．
（3）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的抗盐基因（或目的基因）作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中，观察该烟草植株的生长状态．
8．在细胞免疫中，效应T细胞杀伤靶细胞主要有两种途径：细胞裂解性杀伤（图1）和诱导细胞凋亡（图2）．前者指效应T细胞分泌诸如穿孔素一类的介质损伤靶细胞膜；后者指效应T细胞通过表面FasL与靶细胞表面的Fas结合，诱导靶细胞凋亡．

（1）细胞免疫属于特异性免疫（特异性免疫、非特异性免疫），人体内的效应T细胞可以来自T细胞或
记忆细胞的增殖、分化，细胞免疫就是依靠效应T细胞来杀伤靶细胞的．
（2）图1中的穿孔素又称“成孔蛋白”，由效应T细胞产生释放到细胞外．穿孔素能在靶细胞膜上形成多聚穿孔素管状通道，使K+及蛋白质等大分子物质流出（流入/流出）靶细胞，最终导致靶细胞死亡．
（3）研究发现，某些肿瘤细胞能够调节Fas和FasL基因的表达水平，从而使自己逃脱免疫系统的清除．此时，肿瘤细胞内Fas基因的表达水平变化情况是降低（填“升高”、“不变”或“降低”）．
（4）某些糖尿病患者是在感染了某病毒后患病的．研究表明，胰岛B细胞上的一些物质分子结构与病毒上的抗原分子结构相似，在机体细胞免疫中产生的效应T细胞对胰岛B细胞进行攻击，致其受损进而导致分泌的胰岛素减少，此种糖尿病属于自身免疫病．
7．降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等．人的降钙素活性很低，半衰期较短．某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图．在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象．分析回答下列问题：

（1）Klenow酶是一种DNA聚合酶，合成的双链DNA有126个碱基对．
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证．
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少．
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和载体定向连接（防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接）．
③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有标记基因．
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是合成的核苷酸单链依然较长，产生缺失碱基的现象．
（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是蛋白质工程．
6．在细胞免疫中，效应T细胞作用于靶细胞有两种途径：细胞裂解性杀伤（图1）和诱导凋亡．后者指效应T细胞通过表面FasL与靶细胞表面的Fas结合，诱导靶细胞凋亡：
（1）人体内的效应T细胞来自T细胞或记忆细胞的增殖、分化．
（2）图1中的穿孔素又称“成孔蛋白”，是在效应T细胞的核糖体合成，以胞吐的方式释放到细胞外．穿孔素能在靶细胞膜上形成多聚穿孔素管状通道，使K+及蛋白质等大分子物质流出（流入/流出）靶细胞，最终导致靶细胞死亡．
（3）图2中的FasL又称死亡因子，Fas称死亡因子受体，它们都是由细胞合成并定位于细胞表面的蛋白质．一般来说，控制Fas的基因能在各种细胞内表达，而控制FasL的基因 只在效应T细胞和某些肿瘤细胞内表达．
①Fas和FasL的结合体现了细胞膜的信息交流功能，控制合成Fas和FasL的基因是（是/否）共存于一个细胞中．
②研究发现，某些肿瘤细胞能够调节Fas和FasL基因的表达水平，从而使自己逃脱免疫系统的清除．此时，肿瘤细胞内Fas基因的表达变化情况是降低．（升高/不变/降低）
③免疫排斥是器官移植的一个主要障碍．目前，应对排斥的做法主要是使用一些免疫抑制剂．请根据Fas和FasL的相互关系，提供一种解决免疫排斥的思路降低器官受者FasL基因的表达水平．
5．下列关于生物学知识的叙述错误的是（　　）
①某种蛋白质M和淀粉酶N混合，装入半透膜袋，置于清水中一段时间，在水中检测到物质X，则X不可能是葡萄糖．
②真核细胞与原核细胞相比，细胞更大，物质运输效率更高
③减数分裂的一个细胞周期中染色体复制一次，细胞分裂两次
④狼体内有a种蛋白质，兔体内有b种蛋白质，狼捕食兔后，狼体内的一个细胞中含有的蛋白质种类最可能的是少于a
⑤突变、基因重组和自然选择均能定向改变种群的基因频率
⑥一个物种可以形成多个种群，一个种群中只能含有一个物种．
A．①②⑥B．②③⑤C．②③④D．①④⑥
4．现有两种同科不同属的农作物，甲作物高产不耐盐，乙作物低产但耐盐．欲培育出既高产又耐盐的植株，以适应于盐碱地栽培．请回答下面的问题：
（1）采用转基因（填“杂交”、“嫁接”或“转基因”）方法可以达到上述目的，这种育种方法的优点是能定向的改变生物的性状．
（2）采用细胞工程育种的方法如下：

①甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是形成新的细胞壁．以胚状体为材料，经过人工薄膜包装得到的人工种子，在适宜条件下同样能够萌发成幼苗，与天然种子相比，人工种子具有哪些显著的优点？（请举出1条）生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种的遗传特性、方便贮存和运输．
②动物细胞工程应用较广泛的是单克隆抗体的制备，单克隆抗体最主要的优点是特异性强，灵敏度高．单克隆抗体的应用主要有两个方面，一个是作为诊断试剂，能准确 地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发生特异性反应．另一方面可以用于治疗、预防疾病和运载药物．
3．图a→d 表示连续分裂细胞的两个细胞周期．下列叙述不正确的是（　　）
A．图示可表示两个完整的细胞周期B．c段结束DNA含量增加一倍
C．b段和d段会发生核遗传物质的平分D．b和c可表示一个细胞周期
2．如图表示在一个生态系统中，植物光合作用积累的有机物被植食动物利用的过程．下列有关叙述正确的是（　　）
A．①⑤之和为输入到生态系统的全部能量
B．⑦中的能量属于第二营养级流向分解者的能量
C．冬季在温室中养家畜有利于提高家畜的产量
D．④占②的百分比为能量传递效率
1．若线粒体功能异常，则下列细胞的功能受影响最大的是（　　）
A．红细胞吸收葡萄糖B．小肠上皮细胞吸收水
C．神经细胞排出Na+D．肺泡细胞吸收氧气
17．我国科学工作者已经成功培育了转基因抗虫棉，从而减少了农药的使用，减少了水土污染．
（1）在培育转基因抗虫棉时，最关键的技术环节是基因表达载体的构建，其作用是使目的基因在受体细胞稳定存在、复制并且表达．选取受体细胞，一般用体细胞，将目的基因导人受体细胞的常用方法是农杆菌转化法导入受体细胞后还需要采用植物组织培养技术培育成抗虫植株．
（2）转基因操作工具之一是限制性核酸内切酶，该酶所具有的特异性具体表现在：一种限制酶只能识别特定的核苷酸（DNA）序列，并在特定的位点切割．当限制酶的切割位点在识别序列中轴线的两侧时，切割产生的是黏性末端．
（3）桑基鱼塘生态农业模式将蚕粪喂鱼，塘泥肥田，提高了经济效益，也有良好的生态效益，但这种模式并不适合全国各地，只有在南方降水较多、气候温暖的地区才适用．以上表述体现了生态工程的物质循环再生以及协调与平衡原理原理．
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