3.白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂.由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如下图所示,请回答有关问题:

(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫.已知该基因的全部序列,科研人员可通过人工合成(或“化学合成”)法和 PCR 技术获得大量毒蛋白基因片段.据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒l的过程需要用到的工具酶是NcoI、BamHI
和DNA连接酶.
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaI酶处理,得到酶切片段.重组质粒l的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止重组质粒1酶切片段自身连接(或“相互连接”).将未用去磷酸化酶处理的Bar 基因与重组质粒 l 连接,获得重组质粒2.获得的重组质粒2是图中的C.

(3)将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复.一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌.
(4)提取上述重组白僵菌全部 mRNA,加入逆转录酶,获得 cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR 反应,根据是否有相应产物生成判断毒蛋白基因在白僵菌体内是否完成转录.
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的死亡害虫数,以判断重组白僵菌的杀虫效果.
1.某生物兴趣小组开展探究实验,课题是“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”.
实验材料、用具:菌种和无菌培养液、试管、血球计数板 (计数室为1mm×1mm方格,由400个小格组成)、滴管、无菌水、台盼蓝染液(对活细胞无染色效果)、显微镜等.
酵母菌的显微计数方法:
①血球计数板:是带有微小方格刻度的玻璃片,用于在显微镜下对微生物的计数.
②将含有酵母菌的培养液滴在计数板上,计数一个方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数.连续观察7d,并记录每天的数值.
根据以上叙述回答下列问题:
(1)本实验没有另设对照实验,原因是该实验在时间上形成前后对照.该实验需要(填“需要”或“不需要”) 重复实验,原因是避免实验偶然性带来的误差.
(2)在吸取培养液计数前,要轻轻震荡几次试管,原因是使酵母菌分布均匀.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施是稀释含有酵母菌的培养液.
(3)某同学第5天在使用血球计数板计数时做法如下:
①振荡摇匀试管,取1mL培养液并适当稀释(稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液).
②先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸(吸水纸)吸去,制作好临时装片.
③显微镜下观察计数:在观察计数时只计不被(填“被”或“不被”)染成蓝色的酵母菌.在用血球计数板对某一稀释10倍样品进行计数时,发现在一个小方格内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为5,据此估算10mL培养液中有酵母菌2×109个.
18.研究者为了研究神经元之间兴奋的传递过程,选用枪乌贼的神经组织进行实验,处理及结果见表.请依据表格内容回答相关问题:
实验组号处理微电极刺激突触前神经元测得动作电位/mV室温,0.5ms后测得突触后神经元动作电位/mV
未加河豚毒素(对照)7575
浸润在河豚毒素中5min后6565
10min后5025
15min后400
(1)第Ⅰ组处理说明枪乌贼神经元兴奋时,膜外比膜内电位低(填“高”或“低”)75mV.室温下,微电极刺激突触前神经元测得动作电位0.5ms后,才能测到突触后神经元的动作电位,这被称为“兴奋的延迟”,延迟的原因之一是突触前膜以胞吐的方式释放神经递质,该物质被突触后膜上的特异性受体识别.
(2)已知河豚毒素对于突触后膜识别信息分子的敏感性无影响,从Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组推断,突触后神经元动作电位的降低应该是作用于突触后膜的神经递质数量减少直接引起的,由此可知河豚毒素对神经兴奋的传递起抑制作用.
(3)若利用河豚毒素的生理作用开发药物,可作B、C、D.
A.降糖药      B.麻醉药      C.镇痛剂      D.抗肌肉痉挛剂
(4)研究者利用水母荧光蛋白标记突触前神经元,直接观察到突触前膜先出现钙离子内流,之后引发突触小泡的定向移动.药物BAPTA能迅速结合钙离子,现将该药物注入突触小体内,若突触前神经元的动作电位无改变,神经递质释放量减少,则说明钙离子不影响(填“影响”或“不影响”)突触前神经元产生神经冲动,同时会影响神经元之间兴奋的传递.
 0  115918  115926  115932  115936  115942  115944  115948  115954  115956  115962  115968  115972  115974  115978  115984  115986  115992  115996  115998  116002  116004  116008  116010  116012  116013  116014  116016  116017  116018  116020  116022  116026  116028  116032  116034  116038  116044  116046  116052  116056  116058  116062  116068  116074  116076  116082  116086  116088  116094  116098  116104  116112  170175 

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