17.某研究性学习小组利用荧光素-荧光素酶生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量,以研究人参细胞能量代谢的特点.
实验原理:荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;当荧光素和荧素酶都足量时,在一定范围内,ATP的含量与发光强度成正相关.
实验步骤:
一ATP的提取:称取一定量的人参愈伤组织,研磨后沸水浴10min,冷却至室温,离心,取上清液.
二ATP的测定:吸取一定量的上清液,放入分光光度计反应室内,并注入适量的所需质,在有氧等适宜条件下进行反应,记录发光强度并计算ATP含量.请回答:
(1)步骤一中的沸水浴处理,使酶的空间结构被破坏而失活.
(2)步骤二注入的物质中,属于反应物的是荧光素.分光光度计反应室内能量的转换形式是化学能转_光能(热能).
(3)荧光素酶价格昂贵,为能准确测定出ATP的含量,又能节省酶的用量,学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”,实验结果如图.
①学习小组配制了1×10-8mol/L ATP标准液、浓度分别为0、10、20、30、40、50、60mg/L的荧光素酶和70mg/L的荧光素溶液(过量)溶液进行实验.
②结果表明:图中e点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度.图中e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,这是因为ATP全部水解(或ATP数量限制).
(4)ATP测定对食品卫生监控有重要意义.食品卫生检验人员利用上述生物发光法测定某熟食品样品中细菌的ATP总含量,测算出了细菌的数量,从而判断食品污染程度.做出上述判断的理由是:每个细菌细胞中ATP的含量大致相同(且相对稳定).
 0  114373  114381  114387  114391  114397  114399  114403  114409  114411  114417  114423  114427  114429  114433  114439  114441  114447  114451  114453  114457  114459  114463  114465  114467  114468  114469  114471  114472  114473  114475  114477  114481  114483  114487  114489  114493  114499  114501  114507  114511  114513  114517  114523  114529  114531  114537  114541  114543  114549  114553  114559  114567  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网