基因工程操作步骤中,需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞,图1中①-③示一种筛选方法的过程.pBR322质粒含有两个抗性基因,分别是Amp(氨苄青霉素)抗性基因和Tet(四环素)抗性基因,其中在Tet抗性基因上有下列目的基因的插入位点(插入将导致Tet抗性基因功能性失活),请回答:

(1)图1中①过程所需的酶是
 

(2)经过①过程,ρBR322质粒可能出现的两种结果A是
 

(3)②过程表示用含四环素(使细胞停止生长,但不致死)和环丝氨酸(使生长的细胞致死)的培养基中培养细菌甲,则培养结果C表示培养基中可以存活的细菌包括
 

(4)若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D,则③过程需要做的处理是(请参照过程②的方法)
 

(5)基因工程中使用的Ⅱ型限制性核酸内切酶通常可以识别长度为4-8个核苷酸的特异序列.下面示限制酶Sau3AⅠ对DNA片段切割的结果.

请分析,Sau3AⅠ的识别序列以及切割位点(用“↓”表示)是
 

(6)下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点,图2(含两个抗性基因的质粒)和图3(含目的基因的外源DNA)中箭头表示相关限制酶的酶切位点.
限制酶 XhoⅠ BclⅠ SalⅠ BamHⅠ XbaⅠ
识别序列及酶切位点 C↓TCGAG T↓GATCA G↓TCGAC G↓GATCC T↓CTAGA
据图2和图3分析,为了使目的基因和质粒实现定向连接和便于受体细胞的筛选,切割质粒的限制酶应选用
 
,切割含目的基因的外源DNA的酶应选用
 
 0  108559  108567  108573  108577  108583  108585  108589  108595  108597  108603  108609  108613  108615  108619  108625  108627  108633  108637  108639  108643  108645  108649  108651  108653  108654  108655  108657  108658  108659  108661  108663  108667  108669  108673  108675  108679  108685  108687  108693  108697  108699  108703  108709  108715  108717  108723  108727  108729  108735  108739  108745  108753  170175 

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