如图1是分泌蛋白的合成、加工、分泌过程示意图，图2表示三种动物细胞器中的有机物含量，请据图回答下列问题：

（1）分离细胞器常用的方法是．图2中甲表示的细胞器是，细胞器乙可用图1中的（填字母）来表示．
（2）研究图1生理过程一般采用的方法是，该过程中分泌蛋白分泌出细胞的时（填“需要”或“不需要”）能量．
（3）若图1过程中合成了一条含两个天冬氨酸（R基为-C₂H₄ON）、分子式为CxHyOzN₁₇S₂的多肽链，已知氨基酸的平均分子量为126，则该多肽链形成过程中失去的水分子质量最大为．

高二兴趣小组的同学对某小学一年级的全体学生进行色盲发病率调查，结果汇总如下表，请根据表中数据分析回答：

性状	表现型	2001届		2002届		2003届		2004届
		男	女	男	女	男	女	男	女
色觉	正常	404	398	524	432	436	328	402	298
	色盲	8	0	13	1	6	0	12	0

（1）上述表格中可反映出色盲遗传具有特点．被调查群体中色盲发病率为%（保留二位小数）．
（2）兴趣小组在调查色盲男生甲的家族遗传病史时记录如下：
男生甲：外祖父色盲，外祖母、祖父母、父母均正常．请问：男生甲的家族中色盲基因的传递途径是→→男生甲本人，这种传递特点在遗传学上称为．
（3）调查中发现一男生患有色盲，其同胞姐姐患有白化病，经调查其家族系谱图如图下：

若Ⅲ₇与Ⅲ₉婚配，生育子女中患两种遗传病的概率是．在当地人群中约200个表现型正常的人中有一个白化基因杂合子．一个表现型正常，其双亲也正常，但其弟弟是白化病患者的女人，与当地一个无亲缘关系的正常男人婚配．他们所生孩子患白化病的概率为．

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家．绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能．图1为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

（1）绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程必须用到的生物技术有（至少写出三种）．
（2）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒．限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G^↓GATCC-，限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-^↓GATC-．在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点．
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端（图2）．
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？；理由是：．
（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是．获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是可以．
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序（图3）是：（用数字表示）．
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白．
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的上．
（6）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性核酸内切酶分别切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶．连接产物至少有种环状DNA分子，它们分别是．

人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质．请根据下面图解回答下列问题：
获得甲生物合成该蛋白质的mRNA

A

目的基因

B

与质粒DNA重组

C

导入乙生物细胞

D

获得甲生物的蛋白质．
（1）A过程需要加入的核苷酸所含的碱基是（填符号），甲生物的细胞基因结构的主要特点是．
（2）B过程首先要用酶切断质粒DNA，再用酶将目的基因与质粒连接重组在一起．此过程中，若目的基因的黏性末端为，则质粒与之相对应的黏性末端是．

[生物--选修模块3：现代生物科技专题]
如图一为含有目的基因的外源DNA，图二为某一般质粒，表中是几种限制酶识别序列及其切割位点．用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒．

限制酶	BamH	Sma	EcoR	Hind
识别序列及切割位点

请根据上述信息分析回答：
（1）外源DNA、质粒分别有、个游离的磷酸基团．
（2）用Sma I限制酶切割外源DNA，切开的是和之间相连的键．
（3）如果使用EcoR工酶切割外源DNA和质粒，将目的基因片段与切割后的质粒混合，加入酶，获得的环状DNA可能有几种情况？
（4）如果使用BamH I和HindⅢ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcoRI酶切割的优点是．
（5）经上述操作所得基因表达载体除外，还必须有和，目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用．
（6）将重组质粒导入大肠杆菌中，培养基中需加入进行鉴别和筛选含有的细胞．

抗草胺磷（一种除草剂）转基因大豆的培育过程如如图所示．

（1）用处理，获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草铵膦基因”、含有抗四环素基因的“质粒”．其中质粒上的“抗四环素基因”作用是．
（2）图中①应为．
（3）部分农杆菌不能在培养基（含匹环素）上生长的原因是．
（4）在A→D过程中，A→B过程在恒温箱中（避光、光照）培养，注意观察、记录 的生长情况．
（5）转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，其高效表达的观察指标是．
（6）从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用方法获得目的基因，通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质．下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是．
A．能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一
B．一种运载体只能运载一种目的基因
C．使用的运裁体有质粒、λ噬菌体衍生物和动植物病毒等
D．基因表达载体的构建上是一样的，不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异．

白菜（2n=20）和甘蓝（2n=18）在正常情况下，无法产生可育后代，如图表示利用细胞工程培育杂种植株白菜甘蓝的示意图，根据所学知识，回答下列问题

（1）由白菜体细胞获得A的过程中，一般会用到．
（2）诱导A、B融合为C的过程中常用的诱导剂为，D→E过程表示，此过程植物的代谢类型为，E→F过程中，生长素/细胞分裂素低时，可诱导
形成，此过程（需要/不需要）光照．
（3）经过体细胞杂交技术获得的白菜甘蓝为倍体植株，（可/不可）育．此方法与传统的杂交育种相比，优点在于．
（4）经诱导形成的杂交细胞除了白菜甘蓝杂交细胞外，还有白菜细胞自身融合细胞，甘蓝细胞自身融合细胞，以及未融合的白菜和甘蓝细胞．所以，我们要经过筛选，才能选出合适的细胞进行植物组织培养．请根据给出的材料用具和步骤完成下列细胞筛选过程．
材料用具：融合后的待检测细胞、细胞培养液、克隆化培养装置、显微镜、载玻片、盖玻片、改良苯酚品红染液、体积分数为15%的盐酸溶液等．
第一步：首先对融合后的待检测细胞分别进行克隆化培养．
第二步：．
第三步：．
第四步：．
如果未找到符合条件的细胞，则说明细胞融合失败，需要重新进行诱导融合．

如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：

（1）在基因工程中，A表示，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是，B表示．
（2）B→C为转基因绵羊的培育过程中，其中④用到的生物技术主要有动物细胞培养和．在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有一定量的CO₂，其主要作用是．
（3）B→D过程中，若使用棉花的体细胞为受体细胞，⑤表示的生物技术是．要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：．

芦荟具有一种特殊的CO₂同化方式：夜间气孔开放，吸收CO₂转化成苹果酸储存在液泡中；白天气孔关闭，液泡中的苹果酸分解释放CO₂参与光合作用，如图一、图二．芥兰的CO₂利用过程如图三，请据图回答问题

（1）夜晚芦荟能吸收CO₂（能或不能）合成C₆H₁₂O₆，原因是．白天芦荟进行光合作用所利用的CO₂的来源有．
（2）若白天某时刻改变了某种环境因素：发现芦荟细胞中C₆H₁₂O₆含量增加，这种改变可能是．在白天10：00点时，突然升高环境中CO₂的浓度，短时间内芦荟和芥兰细胞中C₃含量的变化分别是、．
（3）从进化角度看，这种特点的形成是的结果．推测其生活环境的特点是．

回答下列有关遗传信息传递和表达的问题．
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．请回答下列问题：
（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接．
（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为

（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有种不同DNA片段．为了提高实验成功率，需要通过技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝，该方法也是检测多样性最简单的方法．
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是．在导入重组质粒后，为了筛选出含质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养，用影印法接种到只含的培养基中培养，可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞．
（5）假设用BamHⅠ切割DNA获取目的基因，用MboⅠ切割质粒，然后形成重组质粒，若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来，能否用BamHⅠ？．为什么？．