回答下列有关遗传信息传递与表达的问题.
pIJ702是一种常用质粒(如图),其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列.
(1)质粒DNA分子中的两条链靠
 
键维系成双链结构.
(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacⅠ/SphⅠ片段,构成重组质粒pZHZ8.上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中.由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点,并说明判断依据
 

(3)已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8,则参照表1数据可断定酶切产物中最小片段的长度为
 
kb.
表1
 pIJ702pZHZ8
BglⅡ5.7kb6.7kb
ClaⅠ5.7kb2.2kb,4.5kb
PstⅠ5.7kb1.6kb,5.1kb
(3)不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表2所示.若要筛选接纳了pIJ702或pZHZ8的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为
 
μg/mL(填写表格中给定浓度);含有重组质粒pZHZ8的菌落呈
 
色.
表2
固体培养基中硫链丝菌素浓度(μg/mL)012510
不含质粒的链霉菌生长状况+++++++++--
“+”表示生长;“-”表示不长
(4)上述目的基因来源于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误:
 
,并说明依据
 
 0  106629  106637  106643  106647  106653  106655  106659  106665  106667  106673  106679  106683  106685  106689  106695  106697  106703  106707  106709  106713  106715  106719  106721  106723  106724  106725  106727  106728  106729  106731  106733  106737  106739  106743  106745  106749  106755  106757  106763  106767  106769  106773  106779  106785  106787  106793  106797  106799  106805  106809  106815  106823  170175 

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