通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变,请你完成下列实验并回答有关问题。
实验原理:有毒物质能诱导染色体畸变,根据发生染色体畸变细胞的数量(或其占全部培养细胞的百分数),可判断该化学物质的致畸性的强弱。
材料、药品、用具:
活的小白鼠胚胎、某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜等。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入________酶液(写出酶的具体名称)处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养
①.取A、B二个洁净的培养瓶,________。
②.向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀;向B瓶中加入________。在动物细胞培养过程中,由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有________现象,所以细胞停止分裂增殖时,培养瓶壁上形成的细胞层数是________。
(3)制作临时装片
①.细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出二个培养瓶,再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液,加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞。
②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,_____________,3~5min后,盖上盖玻片。
(4) 镜检和统计把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于________期的细胞。并与B组观察结果作对比。
预期结果及相应的结论
(与B组相比较)
如果________,则说明这种化学物质致畸性很强;
如果________,则说明这种化学物质致畸性较弱;
如果________,则说明这种化学物质没有致畸性。
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