天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类.用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用.研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌.获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精.请回答下列问——青夏教育精英家教网——

天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：
(1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是________，用_______将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，此表达载体除目的基因外，必须含有______、_______和标记基因。
(2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是_______________，该项方法要用____________作探针进行检测；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用_____方法检测。
(3)采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增。该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg²⁺)、水、4种dNTP、模板DNA、引物和____________。其中引物有_________种，实质是_______，假如引物都用³H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有³H标记的占____。
(4)已知BarnHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后_______序列明显增多。

(5)基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，__________却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是__________。

红火蚁原分布于南美洲，现已成为世界性的外来危害物种。2011年华南地区也陆续出现蚁情。
(1)入侵华南某地后，红火蚁种群数量迅速增长，其外因是________。由于地理隔离，多年后该种群与原分布地种群的_______会出现差异，最终可能导致生殖隔离。
(2)辛硫磷是一种有机磷杀虫剂，测定其对不同品级红火蚁的致死剂量，及红火蚁乙酰胆碱酯酶的活性，结果如下。

①．实验中每一品级的红火蚁个数不能低于3头，原因是_________。
②．有同学认为，乙酰胆碱酯酶活性越高的红火蚁，需要施加的辛硫磷剂量越大，这个实验结论是否正确？请说明理由。__________________。
③．乙酰胆碱是由突触小体内的________释放的神经递质，能引起肌细胞收缩，随后乙酰胆碱酯酶很快将其水解。喷洒辛硫磷后，红火蚁因肌肉持续收缩而死亡，推测辛硫磷可能的杀虫机理是：_________。
(3)有机磷农药会带来环境污染。若要从土壤中分离、纯化出能分解辛硫磷的微生物，接种的样品应取自_________。从分离到的微生物中提取分解辛硫磷的关键酶，通过改变某些位点上的氨基酸，可显著提高该酶的活性，此技术属于________工程。

2008年诺贝尔化学奖授予了下村脩、马丁?沙尔菲、钱永健三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家，他们代表了绿色荧光蛋白研究上的三个里程碑。请结合所学知识分析回答：
材料一：下村修1962年在普林斯顿大学做研究的时候从一种水母身上分离出绿色荧光蛋白(GFP)。当时知道在蓝光或紫外光的激发下，它会发出绿色荧光。材料二科学家1992年克隆出了GFP基因，随后马丁?沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达成功。之后，会发光的鼠、猪、猫、兔、蝌蚪、鱼也相继问世。下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程：

材料三钱永健通过改造GFP基因，相继制造出了蓝色(BFP)和黃色(YFP)的荧光蛋白。
(1)为了提高实验成功率，需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入___________种引物和____________。
(2)将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是______________。
A．追踪目的基因在细胞内的复制过程
B．追踪目的基因插入到染色体上的位置
C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
(3)材料二中，过程①构建的基因表达载体的组成必需含有启动子、终止子、复制原点、___________、___________。过程④选择代孕母鼠的条件是____________________。
(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因___________________________。
(5)材料三中，钱永健制造出蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，这种现代生物工程技术称为__________。

科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为

A．基因工程
B．蛋白质工程
C．基因突变
D．细胞工程

蛋白质工程的基本流程是
①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列

A．①→②→③→④
B．④→②→①→③
C．③→①→④→②
D．③→④→①→②

下列关于蛋白质工程的叙述错误的是

A．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要
B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构
C．蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子
D．蛋白质工程与基因工程密不可分，又称为第二代基因工程

蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。下图示意蛋白质工程流程，图中A、B在遗传学上依次表示

A．转录和翻译
B．翻译和转录
C．复制和转录
D．传递和表达

L-赖氨酸是哺乳动物蛋白质分子中普遍存在的一种氨基酸，由于谷物中含量甚低，且在加工过程中易被破坏而缺乏，故称为第一限制性氨基酸。请回答以下关于L-赖氨酸的一组问题：

(1)L-赖氨酸在体内无法合成，所以L-赖氨酸是人体的____ __________。
(2)已知L-赖氨酸分子的R基为—(CH₂)₄—NH₂，则L-赖氨酸的结构简式为__ ___。
(3)向泌乳期母牛的乳腺腺泡细胞内注射少量¹⁵N标记的L-赖氨酸，在坐标系中分别画出了放射性¹⁵N在细胞内的核糖体(曲线a)和内质网(曲线b)中含量的大致变化曲线，导致曲线b先增加后减少的原因是： ____________。请在上图中用曲线c表示放射性物质在高尔基体内的含量变化。
(4)玉米籽粒中的赖氨酸含量较低，是因为合成赖氨酸过程中的两种关键的酶的活性受赖氨酸浓度的影响。如果将其中一种酶中的第352位的苏氨酸变为异亮氨酸，把另一种酶中第104位的天冬酰氨变成异亮氨酸，可以使玉米籽粒中游离赖氨酸含量提高2倍，此改造过程即为_____________。

2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

(1)④过程应用的主要生物技术是________。
(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于_________工程技术范畴。
(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点)，据图分析：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加__________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是之一是破坏质粒上的______(填相应基因的简写字母)，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为

，则该酶识别的核苷酸序列是________。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻细胞，观察到的细胞生长的现象是：在含卡那霉素的培养基________(能/不能)生长，在含四环素的培养基中_________(能/不能)生长。

针对蛋白质工程回答下列问题：
(1)科学家测定蛋白质结构时主要采用两类方法，它们分别是__________、___________。
(2)蛋白质工程的关键技术是___________，蛋白质工程的前提条件是___________，蛋白质工程的目的是____________。
(3)提高蛋白质热稳定性方法有____________和___________。
(4)下列物质中，可应用蛋白质工程按人的意愿定向改造的是______。
A．磷脂分子B．白细胞介素—2C．胰岛素D．甲状腺激素

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