如图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

(1)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为
 
. 若图左DNA分子中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共有
 
种不同长度的DNA片段.
(2)为了提高试验成功率,需要通过
 
技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有
 
个.
(3)若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是
 

(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在含
 
的培养基上培养,得到如右图示的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含
 
的培养基上培养,得到如图3的结果(空圈表示与图2对照无菌落的位置).挑选目的菌的位置为
 

(5)若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为
 
 0  103706  103714  103720  103724  103730  103732  103736  103742  103744  103750  103756  103760  103762  103766  103772  103774  103780  103784  103786  103790  103792  103796  103798  103800  103801  103802  103804  103805  103806  103808  103810  103814  103816  103820  103822  103826  103832  103834  103840  103844  103846  103850  103856  103862  103864  103870  103874  103876  103882  103886  103892  103900  170175 

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