玉米的光合效率较水稻的高,这与玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)有很大的关系.如何将玉米的这一种酶转移到水稻等植物上一直是植物生物学家的研究课题之一.但实践证明,常规杂交育种手段很难如愿以偿.最近,有人利用土壤农杆菌介导法,将完整的玉米PEPC基因导入到了水稻的基因组中,为快速改良水稻的光合作用效率,提高粮食作物产量开辟了新途径.
(1)玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交是因为
 

(2)获得PEPC基因后,将其导入土壤农杆菌的质粒中,获得重组质粒需要的工具是
 
,请在框中补充某DNA片段并画出切割形成黏性末端的过程示意图.

(3)导入完成后得到的土壤农杆菌,实际上只有少数导入了重组质粒,可根据质粒中含有的
 
筛选出成功导入了重组质粒的土壤农杆菌.
(4)用含有重组质粒的土壤农杆菌感染水稻细胞,即使感染成功,PEPC基因通过一定途径整合到水稻的基因组中,但不一定会表达,原因最可能是
 

A.玉米和水稻不共用一套密码子
B.水稻中缺乏合成PEPC的氨基酸
C.PEPC基因受到水稻基因组中相邻基因的影响
D.整合到水稻基因组中的PEPC基因被水稻的某种酶破坏了
(5)PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是
 
.如目的基因完成了表达,则其表达过程可表示为
 

(6)得到PEPC基因成功表达的水稻细胞后,科研人员常采用
 
方法获得转基因水稻植株.
多聚半乳糖醛酸酶(PG),能降解果胶使细胞壁破损.番茄果实成熟中,PG合成显著增加,能使果实交红变软,但不利于保鲜,可利用基因工程的方法以其进行改造.请据图1回答:

(1)提取目的基因
①若已获取PG的mRNA,可通过
 
获取PG基因.
②在该基因上游加结构A可确保基因的反义转录,结构A上应具有
 
酶结合位点.得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端.已知BamHⅠ的识别序列如图2-甲所示,请在图2-乙相应位置上,画出目的基因两侧的黏性末端
 

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是
 

(2)用含目的基因的农秆菌感染番茄原生质体后,可用培养基进行筛选.培养24-48h后取样,在质量分数为25%的蔗糖溶液中,观察细胞
 
现象来鉴别细胞壁是否再生.
(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA,且能与
 
互补结合,抑制PG基因的正常表达.若转基因番茄的保质期比非转基因番茄
 
,则可确定转基因番茄成功.
(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,科研人员常采用
 
技术手段使子代保持转基因的优良性状.
(5)改造过程需要的工具酶有
 
,如果在此过程中形成的是平末端,则起“缝合作用的酶是
 

(6)在构建基因表达载体时,除了插入目的基因外,基因表达载体中还需含有
 
,在该番茄薪品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法叫做
 
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