现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱.请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题.
(1)实验原理:
 
.根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性.
(2)材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片.
(3)实验步骤:
Ⅰ、制备细胞悬浮液.
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液.
Ⅱ、进行细胞培养.
①取A、B、C3个洁净的培养瓶,
 

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③把3个培养瓶放在37℃或适宜温度)的恒温箱中培养;
Ⅲ、制作临时装片.
①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,
 
,3-5min后,盖上盖玻片.
Ⅳ、镜检和统计.
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于
 
期的细胞,并与
 
进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值).
(4)结果分析与结论:
①经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%,QB=12.5%,QC=0.1%,由此可知该实验的结论是
 

②在实验中,C培养瓶起
 
作用,C瓶的Q值说明
 
通过动物细胞培养的方法可以研究某种化学物质是否能够使染色体畸变,请你完成下列实验并回答有关问题.
实验原理:有毒物质能诱导染色体畸变,根据发生染色体畸变细胞的数量(或占全部培养细胞的百分数),可判断该化学物质的致畸性的强弱.
材料、药品、用具:
活的小白鼠胚胎某种化学物质、某种酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、生理盐水、灭菌设备、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜.等等.
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入
 
酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液.
(2)进行细胞培养
①取A、B二个洁净的培养瓶,
 

②向A培养瓶中加入适量的该化学物质并将培养瓶摇匀;向B瓶中加入
 
.在动物细胞培养过程中,由于动物细胞在培养瓶中贴壁生长具有
 
现象,所以细胞停止分裂增殖时,培养瓶壁上形成的细胞层数是
 

(3)制作临时装片
①细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出二个培养瓶,再次将瓶内动物细胞处理成细胞悬浮液,加入动物细胞固定液以便迅速杀死并固定细胞.
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,
 
3~5min后,盖上盖玻片.
(4)镜检和统计
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于
 
期的细胞,并与B组观察结果作对比.
预期结果及相应的结论(与B组相比较)
如果
 
,则说明这种化学物质致畸性很强;
如果
 
,则说明这种化学物质致畸性较弱;
如果
 
,则说明这种化学物质没有致畸性.
最近媒体曝光的毒胶囊事件中,问题胶囊铬超标,最高超标90倍,工业明胶中的六价铬是一种毒性很大的重金属,容易进入人体细胞,对肝、肾等内脏器官和DNA造成损伤,有资料称,给实验小鼠饲喂重铬酸钾(含六价铬)0.1~0.5μg/kg可使培养的鼠胚胎细胞产生染色体畸变,从而引起新生个体产生变异.为探究重铬酸钾摄入量的多少对实验小鼠胚胎产生的危害程度,研究人员进行了如下实验.
(一)实验材料
重铬酸钾晶体,生理状况和年龄相同的实验用雌雄小白鼠若干只,小白鼠饲料,鼠笼10只.
(二)实验步骤
(1)分组:将实验小鼠平均分成
 
组,并置于事前编号的笼中饲养,各个笼中放同样数量的雌雄鼠.
(2)饲料的配置:饲喂小鼠的饲料中每公斤分别加入重铬酸钾
 
μg,
以配成含有不同剂量重铬酸钾的鼠饲料.
(3)用(2)组配置的饲料连续饲喂小白鼠三周后提供不加重铬酸钾的饲料饲喂小白鼠,每个鼠舍中保持通风和适宜温度,相同的给水量.
(4)实验结果:对各个鼠笼中产生的鼠仔取相同部位分生组织细胞检查
 
是否发生变化,将结果填写入相关的记录表中.
(三)讨论与分析
(5)第(4)组分生组织细胞检查前要染色用的染色剂是
 

(6)本实验中无关变量为
 
(至少写出2项)
(7)请设计本实验的记录表:
 
 0  102883  102891  102897  102901  102907  102909  102913  102919  102921  102927  102933  102937  102939  102943  102949  102951  102957  102961  102963  102967  102969  102973  102975  102977  102978  102979  102981  102982  102983  102985  102987  102991  102993  102997  102999  103003  103009  103011  103017  103021  103023  103027  103033  103039  103041  103047  103051  103053  103059  103063  103069  103077  170175 

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