探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。
实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。
材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干。无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。
方法步骤:
(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在___________操作。
(2)制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL,转至9mL无菌水的大试管中,依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作,试管口和移液管应在离火焰____cm处。
(3)涂布。按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布____个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布____个平板。
(4)培养。放入恒温箱内,在适宜温度条件下培养3d~4d。一般每隔____小时统计一次,选取____时的记录作为结果,这样可以防止____。
(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时,选取菌落数在___________的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌落数是___________。(稀释度是105)
(6)预期结果。相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数____(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是______________。
 0  10134  10142  10148  10152  10158  10160  10164  10170  10172  10178  10184  10188  10190  10194  10200  10202  10208  10212  10214  10218  10220  10224  10226  10228  10229  10230  10232  10233  10234  10236  10238  10242  10244  10248  10250  10254  10260  10262  10268  10272  10274  10278  10284  10290  10292  10298  10302  10304  10310  10314  10320  10328  170175 

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