题目内容
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量 。
（2）细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用 消化处理。
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 或 合成水平的差异，确定Y的药效。
（1）多（1分）（2）维持培养液pH（2分）（3）停止（2分） 多（2分） 胰蛋白酶（2分）（4）Y mRNA 蛋白质（每空2分，共6分）
解析试题分析：（1）癌细胞为恶性增殖细胞，分裂速率比肝细胞快，故一段时间后其数量比肝细胞多。
（2）细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液pH，保证细胞生活正常环境。（3）动物细胞铺满瓶壁时，由于接触抑制，生长停止。癌细胞传代的次数比肝细胞多。用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要胰蛋白酶处理，分散细胞。（4）该对照实验的自变量为抗肿瘤药物Y，故实验组为加Y，对照组加无菌生理盐水。因变量为X基因合成的 mRNA或蛋白质量。
考点：本题考查细胞培养相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系能力；具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。
阅读快车系列答案
（8分）菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程，请据图回答：
（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感。）
（1）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用______________处理土壤农杆菌，使其处于感受态。
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够_______________________的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的_______________上，最终形成转基因植株。
（3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和_____________的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。
（4）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据________________的核苷酸序列设计特异引物，以________________为模板进行第一轮扩增。
（5）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。
| 组别 | 死亡率（%） | |
| 实验组 | 转基因植株1 | 60.00 |
| 转基因植株2 | 53.33 | |
| 对照组 | 13.33 | |
①对照组应饲喂等量的_______________________________。
②据表分析，______________________________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
