题目内容
（15分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有____ 、____个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的Sma Ⅰ酶切位点越多，质粒的热稳定性越______。
(3)要用图1中的质粒和图2中外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割,原因是 。
(4)与只使用EcoR Ⅰ相比较，使BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________ __。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_________________________________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在____________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
(1)0、2 (2)高 (3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接 (6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 (7)蔗糖为唯一含碳营养物质
解析试题分析：(1) 该质粒为环状，在没有经过SmaⅠ切割前，其不含游离的磷酸基团；当被SmaⅠ酶切割后该质粒变成以一条DNA分子，含有两条单链，而在每条单链的5′端会都含有一个游离的磷酸基团。
（2）因为对该该质粒进行改造是只插入SmaⅠ酶切位点，相对于质粒的热稳定性而言，含有的C-G碱基对越多，则所含的氢键越多，其热稳定性越高。
（3）在质粒和目的基因上都有一个SmaⅠ酶的内切位点，当使用SmaⅠ酶时，会导致质粒上的抗生素抗性基因、目的基因被破坏。抗生素抗性基因被破坏会导致后期在筛选时无法根据抗性基因进行筛选，目的基因被破坏则导致无法得到相应的目的基因的产物。
（4）因为如果只使用同一种限制性内切酶，则形成的黏性末端都相同，质粒可以和目的基因进行重组，同时质粒也可以与质粒重组、目的基因也可与目的基因重组，这样就达不到试验的目的。
（5）质粒与目的基因都是DNA，要想将两个DNA连接在一起，则需要使用DNA连接酶。
（6）载体中一般需要用抗性基因作为标记基因，这样有利于在后期对含有目的基因的细胞进行筛选。
（7）由于该细胞已经丧失了对蔗糖吸收的能力，所以只有导入重组质粒的细胞能够吸收蔗糖，故只能在培养基中加入蔗糖作为其碳源，为其提供营养物质。
考点：本题考查基因工程相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
(每空1分，共8分)下列表格为某肌肉细胞在静息状态下，细胞内外离子浓度大小（单位：mmol/L），示意图为人手指意外触到蜡烛火焰，引起屈肘反射的反射弧示意图。
| 离子种类 | Na＋ | K＋ | 其他阳离子 | 其他阴离子 |
| 细胞内部 | 10 | 140 | a | c |
| 细胞外部 | 150 | 4 | b | d |
请分析回答：
（1）从表格信息可以看出，细胞外液的渗透压主要是由_________来维持。
（2）静息状态下，细胞内外离子浓度能维持上述水平，其主要的原因是细胞膜上________________________________________的种类和数量限制了离子的出入。
（3）图中神经元a产生的兴奋在传入神经纤维上以________形式进行传导。当神经冲动传到神经末梢时，引起突触前膜内 释放神经递质，该递质与神经元b细胞膜上 结合，使神经元b兴奋。神经元b的神经冲动进一步引起神经元c兴奋，最终导致屈肌收缩。
（4）图中M点兴奋时，此处神经纤维膜两侧的电位表现为 。
（5）手指意外触到火焰引起局部皮肤红肿，是因为皮肤毛细血管舒张和通透性增加，________________引起组织间隙液体积聚。若手指伤口感染，可引起体液中吞噬细胞和杀菌物质抵制病菌侵害，此过程属于________免疫。
-淀粉酶合成和分泌的示意图，其中甲、乙、丙表示有关结构，①、②、③表示有关过程。据图回答：
