题目内容
回答下列有关基因工程和酶工程的有关问题(9分)
下图所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程。
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选用质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:
59.构建含目的基因的重组质粒A时,应选用限制酶 ,对 进行切割。再用 进行重组。
60.图中质粒同时用PstⅠ和ApaⅠ酶切,产生1800对碱基和8200对碱基的两种片段,如用以上四种酶同时切割此质粒,则产生600对碱基和8200对的碱基两种片段,那么用同时用PstⅠ和EcoRⅠ酶切,则产生的片段有 。
61.筛选后所得到的工程菌增值后表达出大量此蛋白酶,但此蛋白酶不会分泌到细胞外,因此还需要利用酶工程中的 技术获得此蛋白酶,
62.获得此蛋白酶后,利用酶的固定化技术能回收和重复利用此蛋白酶,以下属于固定化技术中的载体结合法的是( )
59. PstI、EcoRI(2分) 质粒和含目的基因的DNA(2分) DNA连接酶
60. 1200对碱基和8800对碱基(2分)
61. 分离提纯
62. C
练习册系列答案
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回答下列有关基因工程的问题。
(1)基因工程中使用的限制酶,其特点是______________。
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。![]()
(2)将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有_________。(可多选)
| A.X-1 |
| B.X-2 |
| C.X-3 |
| D.X-4 |
(4)如果X-1用E1酶切,产生850对碱基和3550对碱基两种片段:那么质粒X-2(Tcr基因的长度为1200对碱基)用E2酶切后的片段长度为_________对碱基。
(5)若将外源的Tcr基因两端用E2切开,再与用E2切开的X-1混合连接,并导入大肠杆菌细胞,结果显示,含X-4的细胞数与含X-1的细胞数之比为13,增大DNA连接酶用量能否提高上述比值?__________________。
原因是__________________________。