Question

如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图同答：

（1）分析可知，科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的

 

，最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于

 

．
（2）图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为

 

，常用的方法是

 

．
（3）图示中，作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在

 

期，常通过

 

（物理方法）进行激活，使其完成减数分裂和发育进程．
（4）培养图示重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为

 

培养基．通常在培养基中还需要加入适量的

 

等天然成分．
（5）图示重组细胞培养至一定阶段可通过

 

方法，从而一次获得多个转基因猪．过程⑧的实质是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程,胚胎分割移植

专题：

分析：1、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术．来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一．
2、胚胎移植--是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．胚胎移植简单概括为早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移．
3、受体细胞常选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质．

解答： 解：（1）图中所示的限制酶PstI和EcoRⅠ可以切割DNA片段，获取绿色荧光蛋白基因，并不能破坏目的基因．限制酶切割产生的DNA片段末端不平整，即末端为黏性末端．
（2）转化是指将目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程．如图示将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程．因受体细胞为动物细胞，常用的方法是显微注射法．
（3）受体细胞常选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质．一般取处在MⅡ中（减数第二次分裂中）期的去核卵母细胞作为受体细胞的，通过电脉冲（或电刺激）进行激活，使其完成减数分裂和发育进程．
（4）培养图示重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基．动物细胞所需的营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．通常在培养基中还需要加入适量的血清（或血浆）等天然成分．
（5）胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割，经移植获得同卵双胚或多胚，从而获得较多基因型相同的转基因猪．图示重组细胞培养至桑椹胚或囊胚，可通过胚胎分割、胚胎移植方法，从而一次获得多个转基因猪．过程⑧是胚胎移植过程，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移．
故答案为：
（1）PstⅠ和EcoRⅠ黏性末端
（2）转化                        显微注射法
（3）MⅡ中（减数第二次分裂中）     电脉冲（或电刺激）
（4）合成                        血清（或血浆）
（5）胚胎分割、胚胎移植     早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移

点评：本题着重考查了基因工程、胚胎工程等方面的知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．