题目内容
7．基因工程自20世纪70年代兴起后，目前巳成为生物科学的核心技术，并在实际领域--农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面，也展示出美好的前景．请回答下列有关基因工程的问题．（1）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建．若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择T4DNA连接酶进行连接．
（2）将目的基因导入到植物细胞采用最常用的方法是农杆菌转化法，该方法通常要把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，这是利用T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上的功能．
（3）在基因工程操作中，若要在短时间内大量获取目的基因，可用PCR技术扩增DNA．该技术的原理是DNA（双链）复制．
分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
解答 解：（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达，其中核心步骤是基因表达载体的构建．E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，因此若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，则应选择T4DNA连接酶进行连接．
（2）将目的基因导入到植物细胞常用农杆菌转化法，该方法通常要把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，这是利用T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上的功能．
（3）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA复制．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建 T4DNA连接酶
（2）农杆菌转化法 Ti质粒
（3）PCR技术 DNA（双链）复制
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，了解基因工程技术的相关应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．
①致病基因是显性基因
②致病基因是隐性基因
③致病基因位于常染色体上
④致病基因位于X染色体上
⑤致病基因位于Y染色体上
⑥出生的男孩子多于女孩子
⑦男性只有一条X染色体，女性有两条X染色体．
| A． | ①④⑥ | B． | ②④⑦ | C． | ①③⑤ | D． | ⑤⑥⑦ |
| A． | 具有分裂能力的细胞不一定都有细胞周期 | |
| B． | 被HIV病毒感染的T细胞的清除过程属于细胞凋亡 | |
| C． | 人体衰老的细胞体积变小，核体积变大，代谢减弱 | |
| D． | 动物ES细胞经体外诱导分化成多种组织细胞，体现细胞的全能性 |
| A． | 每个可以表达腺苷酸脱氨酶的大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 | |
| B． | 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 | |
| C． | 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada | |
| D． | 每个插入的ada至少可以表达一个腺苷酸脱氨酶分子 |
| A． | 可用胶原蛋白酶分散组织块中的细胞 | |
| B． | MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化 | |
| C． | 加入培养液中的MEF细胞最好是来自传代培养的细胞 | |
| D． | 细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象 |
转基因抗虫棉是人们较早应用基因重组技术的推广项目，目前转基因技术有了新的改进．如图所示．请根据所学知识回答下列问题：| A． | 孟德尔 | B． | 摩尔根 | C． | 萨顿 | D． | 约翰逊 |