题目内容

14．丁酸梭菌，又名酪酸梭菌，是存在于人和禽畜肠道中的一种厌氧细菌，能抑制肠道中有害菌的生长并促进有益菌的生长，可用作禽畜饲料添加剂．某科研人员从断奶仔猪的盲肠内容物中分离培养丁酸梭菌，进行了一系列相关实验．配制丁酸梭菌增殖培养基，培养基的成分如表中所示．
成分酵母膏牛肉膏胰蛋白胨葡萄糖可溶性
淀粉		氯化钠三水合
乙酸钠		半胱氨酸 盐酸盐蒸馏水
含量3g10g10g5g1g5g3g0.15g1000mL
（1）微生物生长繁殖所需的培养基中的主要物质有碳源、氮源、水和无机盐．若要制备固体培养基，除上述成分外，还需加入的成分是琼脂．为了保证无菌操作，调节pH后应对培养基进行处理，常采用的方法是高压蒸汽灭菌法．
（2）除了保证无菌操作外，培养丁酸梭菌时还需要提供无氧环境，于37℃下培养36h左右．
（3）为统计丁酸梭菌的数目，将分离得到的一个丁酸梭菌菌落置于1L无菌水中，搅拌均匀后，取0.1mL上述液体用稀释涂布平板法接种在一个培养皿上，重复操作，共制成三个带菌培养皿，继续培养一段时间后，统计三个培养皿中的菌落数分别是236、227、242，则该菌落中丁酸梭菌的数目大致为2.35×l06个．
（4）用上述方法测得的丁酸梭菌的数量小于（填“大于”、“等于”或“小于”）菌落中实际丁酸梭菌的数量，可能的原因是两个或多个丁酸梭菌连在一起时形成一个菌落．

分析 1．培养基的概念、种类及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质．

（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2、微生物分离和纯化的方法：
①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面．
②稀释涂布平板法：将骏业进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．

解答 解：（1）微生物生长繁殖所需的培养基中的主要物质有碳源、氮源、水和无机盐．若要制备固体培养基，还需加入琼脂作为凝固剂．为了保证无菌操作，调节pH后应对培养基进行高压蒸汽灭菌处理．
（2）根据题意可知，丁酸梭菌是一种厌氧细菌，因此除了保证无菌操作外，培养丁酸梭菌时还需要提供无氧环境，于37℃下培养36h左右．
（3）为统计丁酸梭菌的数目，需要采用稀释涂布平板法，即将分离得到的一个丁酸梭菌菌落置于1L无菌水中，搅拌均匀后，取0.1mL上述液体接种在一个培养皿上，重复操作，共制成三个带菌培养皿，继续培养一段时间后，统计三个培养皿中的菌落数分别是236、227、242，则该菌落中丁酸梭菌的数目大致=（236+227+242）÷3÷0.1×1000=2.35×l06个．
（4）由于两个或多个丁酸梭菌连在一起时形成一个菌落，因此用上述方法测得的丁酸梭菌的数量小于菌落中实际丁酸梭菌的数量．
故答案为：
（1）无机盐     琼脂     高压蒸汽灭菌法
（2）无氧
（3）稀释涂布平板     2.35×l06
（4）小于      两个或多个丁酸梭菌连在一起时形成一个菌落

点评 本题主要考查微生物的实验室分离和培养，要求考生能够掌握微生物分离与纯化的方法，识记培养基配置的原则，掌握无菌技术的主要内容，再结合所学知识准确答题．

练习册系列答案
相关题目
4．如表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：
KH2PO4Na2HPO4MgSO4•7H2O葡萄糖尿素蒸馏水
在1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g定容1000mL
（1）根据配方可知该培养基只允许分解尿素的细菌生长，从功能上看，这种培养基被称作选择培养基．为防止杂菌污染，对培养基采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（2）若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，上述培养基中还需要添加凝固剂（或琼脂），接种时应采用稀释涂布平板法．该方法接种培养后的菌落如图，其中适合用于计数的平板是C．

（3）某同学涂布平板时用0．lmL稀释液，稀释液的稀释倍数为105，平板中测得菌落数的平均值为163，则每1mL样品中的细菌数约是1.63×l08个．从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其作进一步的鉴定，可在上述培养基中加入酚红指示剂．
5．铁细菌能氧化硫酸亚铁，并利用氧化过程中释放的化学能合成有机物．下列生物与之最相似的是（　　）
A．乳酸杆菌B．酵母菌C．大肠杆菌D．硝化细菌
2．为探究油菜素内酯（BL）对生长素（IAA）生理作用的影响，做了如图实验：

（1）实验一：利用不同浓度的BL和IAA处理油菜萌发的种子，观察其对主根伸长的影响，结果如上甲图所示．单独IAA处理，对主根伸长的影响是低浓度促进伸长，高浓度抑制伸长；BL与IAA同时处理，在IAA浓度范围为0-10nM时，BL对主根伸长的抑制作用逐渐增强；当IAA浓度继续增加时，BL对主根伸长的影响是促进．
（2）实验二：用放射性碳标记的IAA处理主根，检测油菜素内酯对于生长素运输的影响，实验方法及结果如上图乙所示．标记的生长素在根部的运输方向为双向，BL可以促进（促进/抑制）生长素运输，且对极性运输（运输方向）的作用更显著．
（3）实验三：PIN蛋白与生长素的运输有关．测定了BL处理的根部组织中PIN蛋白基因的表达水平，结果如表所示．
测定方法：从植物特定组织中提取RNA，利用RNA为模板经逆转录得到cDNA；以该cDNA为模板进行PCR，向反应体系中加入dNTP、Taq酶及不同的引物得到不同的DNA片段．根据扩增出的不同DNA片段的量不同，反映相关基因在特定组织中的转录水平，用以代表相应基因的表达水平．
测定指标组别PIN蛋白基因表达水平（相对值）
对照组7.3
一定浓度BL处理组16.7
（4）上述系列实验结果表明，油菜素内酯通过影响根细胞中PIN蛋白基因的表达，进而影响生长素的运输．
9．下列有关RNA及其合成的叙述正确的是（　　）
A．RNA的合成必须以DNA为模板
B．RNA的合成场所只有细胞核
C．RNA是部分病毒及细胞质中的遗传物质
D．合成过程中伴有ATP的水解
19．春天日照逐渐延长时，鸟类大多进入繁殖季节，鸟类繁殖活动图解如图：

请回答：
（1）鸟类的繁殖活动是通过机体的神经-体液调节完成的．机体中既能传导兴奋，又能分泌激素的细胞位于下丘脑．
（2）图解中的A、B、C分别代表下丘脑、垂体和性腺分泌的物质，则A是：促性腺激素释放激素，C进入血液后，通过反馈作用来调节下丘脑和垂体相关激素的合成和分泌．
（3）据图判断，要验证B的生理作用不能（能、不能）用去除性腺的鸟作为实验动物．
（4）从性腺的静脉中抽取血液进行检测，血浆中含有的激素种类有④（填下列序号）
①1种        ②2种        ③3种       ④3种以上．
6．基因表达受许多因素影响，下列叙述错误的是（　　）
A．基因的选择性表达与酶无关
B．线粒体中可以发生基因的表达过程
C．缺乏逆转录酶，逆转录病毒的基因无法表达
D．mRNA的破坏，会导致相关基因无法表达
3．将某植物细胞置于大于该细胞细胞液浓度的硝酸钾（KNO3）溶液中，一段时间后在显微镜下发现该细胞未发生质壁分离，其原因可能是该细胞：①是死细胞；②质壁分离后又自动复原； ③大量吸水； ④大量失水死亡．（　　）
A．①②④B．①②C．②③D．②④

下列关于果酒制作过程中的叙述，正确的是（ ）

A．应先除去葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底

B．使发酵装置的温度维持在20℃左右最好

C．在发酵过程中，需从充气口不断通入空气

D．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需对所用装置进行消毒处理

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