4.基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA 片段的敲除、加入等.继CRSPRI/Cas9 系统基因编辑技术风靡全球实验至后,我国韩春雨研究团队提出了NgAgo-gDNA 基因编辑工具,但却引起了科学界的质疑.为了探究NgAgo-gDNA 系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷,复旦大学和南通大学联合进行了研究.请回答下列问题.
(1)探究一:NgAgo-gDNA 系统能否使斑马鱼眼睛缺陷?
方法:首先推测构成NgAgo 蛋白的氨基酸序列,在试管中合成mRNA,并将其与单链gDNA 混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中,进行胚胎培养.培养液需含有葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和动物血清(或动物血浆)等.小斑马鱼的形成不需要(填“需要”或“不需要”)进行胚胎移植.单链gDNA 与Fabplla 基因的碱基互补配对与Fabplla 基因转录时的碱基互补配对相比,区别是前者碱基A-T配对,后者碱基A-U配对.
结果:实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷.
(2)探究二:斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla 基因发生突变引起的?
方法:从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla 基因,对其使用PCR 技术进行扩增,并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能.PCR 技术扩增Fabplla 基因时,需要提供模板、原料、热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)、引物等条件.将模板DNA 加热至90~95℃,该处理的目的是使目的基因DNA受热变性后解旋为单链.
结果:NgAgo-gDNA 系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla 基因的mRNA 来恢复,而且对Fabplla 基因测序结果发现其序列与对照组相同.
初步结论:斑马鱼眼睛缺陷是由Fabplla基因转录受阻导致的,而非基因突变引起的.
(3)转基因技术是一把双刃剑,它既可以造福人类,也可能在使用不当时给人类带来灾难.面对转基因技术可能产生的负面影响,公众不可避免地产生了疑虑,引发了人们在食物安全、生物安全和环境安全 三个方面发生激烈的争论.

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