题目内容
【题目】图（a）中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的）。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接，理由是____________。
（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有____________，不能表达的原因是____________。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有____________和___________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________。
【答案】 Sau3A I 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端 甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，两者目的基因均不能转录 EcoliDNA连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA 连接酶
【解析】试题分析：根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类
①应选择切点位于目的基因两端的限制酶；②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶；③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，但要确保质粒上也有这两种酶的切点。
（1）由于限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后产生的片段具有相同的黏性末端，所以经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3AⅠ酶切后的产物连接。
（2）启动子是一段有特殊序列的DNA片段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。终止子也是一段有特殊结构的DNA短片段，相当于一盏红色信号灯，使转录在所需要的地方停止下来。在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才能表达。而图甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，两者目的基因均不能转录，所以都不能表达目的基因的产物。
（3）常见的DNA连接酶有EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。
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【题目】“种群存活力”分析可用于研究一些因素如何影响到种群灭绝的可能性，这种研究方法目前已被用来评价秦岭大熊猫现有种群的存活能力，并借此探讨相应的保护措施。请回答下列问题：
（1）研究秦岭大熊猫种群动态，常需要调查种群密度，它是种群最基本的_______特征。
（2）在环境条件不变的情况下，对秦岭大熊猫进行“种群存活力”分析时，得到如下表所示的数据，请据表分析回答。
初始种群规模/只 | 10 | 20 | 25 | 28 | 30 | 40 | 50 | 70 |
种群在200年内的灭绝概率 | 0.412 | 0.132 | 0.076 | 0.065 | 0.041 | 0.010 | 0.002 | 0 |
若以“种群在200年内的灭绝概率小于5%”作为种群可以维持存活的标准，则该种群维持存活所需的最小初始规模范围在______________只之间。
（3）若以环境质量下降、自然灾害以及人类的偷猎和捕捉等限制种群数量增长的环境阻力为“限制压”，下图曲线表示不同“限制压”下（以小数表示）初始规模不同的种群与其在200年内的灭绝概率（%）的关系。请据图分析：
由图可知，随着限制压的增大，种群灭绝的可能性会_________，维持种群存活的最小规模会________（填“增大”减小”或“不变”）。若种群的灭绝概率为5%，则当限制压为0.02时，“最小存活种群”的规模为__________只。
（4）基于上述研究结果，请你提出2个针对秦岭大熊猫的保护建议：_______________________
