题目内容
14.(l)将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒,需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶.常用的基因工程载体除动植物病毒外,还有质粒和λ噬菌体衍生物等.
(2)限制酶能将特定序列的核苷酸之间的磷酸二酯键切开,形成黏性末端或平末端.
(3)在“今义生”的生产中,科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的复制原点,以获得更高的安全性能.p53基因应插入载体的启动子和终止子之间,以便于基因的表达.
(4)p53基因的大量扩增可以采用PCR技术,该技术中需使用的一种特殊的酶是Taq酶.如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图,扩增过程需要2种引物.n次循环之后,只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为$\frac{{2}^{n}-2n}{{2}^{n}}$.
分析 PCR技术扩增目的基因(适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况).PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术,其原理是DNA复制,需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶),以指数的方式扩增,即约2n.引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点.
解答 解:(1)腺病毒可作为运载体,将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒,即基因表达载体的构建,需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶.常用的基因工程载体除动植物病毒外,还有质粒和λ噬菌体衍生物等.
(2)限制酶识别将特定核苷酸序列并切割特定的切割位点,作用对象是将磷酸二酯键切开,形成黏性末端或平末端.
(3)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存.②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入.③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择.但“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后,在宿主细胞内不能复制,不能整合到染色体上.在“今义生”的生产中,科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的复制原点,以获得更高的安全性能.启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质.终止子也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端.因此,p53基因应插入载体的启动子和终止子之间,以便于基因的表达.
(4)PCR技术需使用Taq酶,扩增过程需要2种引物.![]()
由图分析可知:
X基因第一次复制得到两个两种:①和②;
X基因第二次复制得到四个四种:①复制得①和③、②复制得②和④;
X基因第三次复制得到八个五种:①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤;
X基因第四次复制得到16个五种:①复制得①和③、两个③复制得两个③和两个⑤、两个④复制得两个④和两个⑤.两个⑤得到4个⑤.
从上面的推测可知,第三轮循环产物中才能开始出现独立且完整的X基因,即⑤.n次循环之后,只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为$\frac{{2}^{n}-2n}{{2}^{n}}$.
故答案为:
(1)限制酶和DNA连接酶 质粒和λ噬菌体衍生物等
(2)磷酸二酯 黏性末端或平
(3)复制原点 启动子和终止子
(4)Taq酶 2 $\frac{{2}^{n}-2n}{{2}^{n}}$
点评 本题考查了基因工程的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系;理论联系实际,综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力.
| A. | 此细胞是真核细胞 | B. | 此细胞不可能是高等植物细胞 | ||
| C. | 结构2是两个中心体 | D. | 在结构1、3、5中含有核酸 |
| A. | 大尾屏雄孔雀对配偶的吸引力决定雄性蓝孔雀的进化方向 | |
| B. | 大尾屏雄孔雀易遭到天敌的捕杀会改变其种群的性别比例 | |
| C. | 生物进化的实质在于保存更适应环境的性状 | |
| D. | 异性孔雀间传递的行为信息有利于种群的繁衍 |
| A. | 细胞膜 | B. | 核糖体 | C. | 核膜 | D. | 内质网 |
| A. | ③构成细胞膜的基本骨架 | B. | 钾离子通过细胞膜需要②的协助 | ||
| C. | 细胞识别与糖蛋白①有关 | D. | ②能够流动,③静止不动 |
| A. | 囊泡膜与细胞膜、细胞器膜和核膜等共同构成生物膜系统 | |
| B. | 内质网、高尔基体、细胞膜依次参与RNA聚合酶分泌过程 | |
| C. | 图中囊泡膜与靶膜的结合过程体现细胞膜流动性特点 | |
| D. | 图中T-SNARE与V-SNARE的结合存在特异性 |