p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复.使其恢复正常.或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡.阻止细胞癌变．“今又生是我国首创的基因治疗药物之一.是世界首个获准上市的基因治疗药物.其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生药物中的腺病毒经基因工程改造后.在宿主细胞内� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

14．

p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：
（l）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有质粒和λ噬菌体衍生物等．
（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的磷酸二酯键切开，形成黏性末端或平末端．
（3）在“今义生”的生产中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的复制原点，以获得更高的安全性能．p53基因应插入载体的启动子和终止子之间，以便于基因的表达．
（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是Taq酶．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要2种引物．n次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为$\frac{{2}^{n}-2n}{{2}^{n}}$．

分析 PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）．PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制，需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），以指数的方式扩增，即约2n．引物是一段短的单链RNA或DNA片段，可结合在核酸链上与之互补的区域，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点．

解答解：（1）腺病毒可作为运载体，将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，即基因表达载体的构建，需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有质粒和λ噬菌体衍生物等．
（2）限制酶识别将特定核苷酸序列并切割特定的切割位点，作用对象是将磷酸二酯键切开，形成黏性末端或平末端．
（3）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存．②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．但“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．在“今义生”的生产中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的复制原点，以获得更高的安全性能．启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．终止子也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端．因此，p53基因应插入载体的启动子和终止子之间，以便于基因的表达．
（4）PCR技术需使用Taq酶，扩增过程需要2种引物．
由图分析可知：
X基因第一次复制得到两个两种：①和②；
X基因第二次复制得到四个四种：①复制得①和③、②复制得②和④；
X基因第三次复制得到八个五种：①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤；
X基因第四次复制得到16个五种：①复制得①和③、两个③复制得两个③和两个⑤、两个④复制得两个④和两个⑤．两个⑤得到4个⑤．
从上面的推测可知，第三轮循环产物中才能开始出现独立且完整的X基因，即⑤．n次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为$\frac{{2}^{n}-2n}{{2}^{n}}$．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶   质粒和λ噬菌体衍生物等
（2）磷酸二酯    黏性末端或平
（3）复制原点    启动子和终止子
（4）Taq酶   2   $\frac{{2}^{n}-2n}{{2}^{n}}$

点评本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．

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下列有关细胞核的叙述，错误的是

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9．回答下列有关基因工程的问题．
苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（apm^r为抗氨苄青霉素基因），①～④表示过程．

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A．

B．

C．

D．

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1．科学家发现了囊泡运输调控机制．如图是囊泡膜与靶膜融合过程示意图，囊泡上有一个特殊的V-SNARE蛋白，它与靶膜上的T-SNARE蛋白结合形成稳定的结构后，囊泡膜和靶膜才能融合，从而将物质准确地运送到相应的位点．下列叙述错误的是（　　）

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