题目内容
请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题:
(1)DNA粗提取的实验原理是:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在 mol/L的NaCl溶液中的最低;鉴定DNA所用的试剂是 ,沸水浴加热呈 色;实验中使用酒精的目的是 ;实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA,第二次目的是 。
(2)PCR技术的中文全称是 ,在操作过程中需要添加引物,它的化学本质是 。反应过程中控制不同温度的意义是不同的: 90℃以上时 ,双链DNA解聚为单链;50℃左右时 ,引物与两条单链DNA结合; 72℃左右时延伸,Taq DNA聚合酶有最大活性,使DNA新链沿着 方向延伸。
(3)血红蛋白的提取和分离试验中,分离纯化常用的方法有凝胶色谱法和电泳法,前者的原理是 ,后者的原理是 ,在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是 。
(1)0.14 二苯胺 蓝 除去溶于酒精的蛋白质 稀释NaCl溶液
(2)多聚酶链式反应 DNA或RNA 变性 复制 5′端向3′端
(3)根据相对分子质量的大小分离蛋白质 (2分)
各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同(2分)
让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能
解析试题分析:(1)DNA粗提取的实验原理是:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14mol/L的NaCl溶液中的最低;鉴定DNA所用的试剂是二苯胺试剂,沸水浴加热呈蓝色;实验中使用酒精的目的是除去溶于酒精的蛋白质;实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA,第二次目的是稀释NaCl溶液。
(2)PCR技术的中文全称是多聚酶链式反应,引物其实是一段核苷酸序列,它的本质是DNA或RNA,反应过程中控制不同温度的意义是不同的: 90℃以上时变性,50℃左右时复制,72℃左右时延伸,Taq DNA聚合酶有最大活性,使DNA新链沿着5′端向3′端方向延伸。
(3)血红蛋白的提取和分离试验中,凝胶色谱法的原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质,电泳法的原理各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同,在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能。
考点:本题考查DNA的粗提取和鉴定实验、PCR技术及血红蛋白的提取和分离实验,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构的能力。
分析有关微生物的资料,回答问题并完善实验设计方案。(10分)
脂肪酶具有广泛的应用前景,为获得 高产脂肪酶的菌株,并将之用于产业化,进行如下的系列实验。
1.欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应选择下列固体培养基(仅列出了碳氮源)中的___。
| A.蛋白胨、柠檬酸铁铵 | B.橄榄油、硫酸铵 |
| C.乳糖、酵母膏 | D.葡萄糖、蛋白胨 |
3.补全表3中的实验方案,以确定所选碳源的最佳浓度(设浓度梯度的差值为0.2%)。
4.利用相似方法探得理想碳源的最佳浓度,在进一步确定碳氮源浓度的最佳组合。以a和b分别代表碳源和氮源的浓度,假设酶活a1>a2>a3;b2>b3>b4,据此形成下列四种方案,其中最佳的是_______。
方案一:a1和b2组合。
方案二:将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合,根据酶活取其中的最佳组合。
方案三:a1和b2组合,a2和b3组合,根据酶活取其中的最佳组合。
方案四:a1分别与每种氮源浓度组合,b2分别与每种碳源浓度组合,根据酶活取其中的最佳组合。
5.如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活,则应选择图中的_______固定化工艺。.