为了测定某种分解纤维素的微生物生长所需要的最适pH.某同学设计了下列实验步骤:①配制适宜的培养基.分别装到锥形瓶中.用缓冲液分别调pH为4.0.4.5.5.0.5.5.6.0.并分别标号为Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ.Ⅳ.Ⅴ.②将每瓶培养基等量分别装到5支试管中.加棉塞并包扎成5捆.③将试管放到1个大烧杯中.在酒精灯上加热煮沸10min灭菌.待温度冷却到50℃.将试管搁置斜面.� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

为了测定某种分解纤维素的微生物生长所需要的最适pH，某同学设计了下列实验步骤：
①配制适宜的培养基，分别装到锥形瓶中，用缓冲液分别调pH为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，并分别标号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。
②将每瓶培养基等量分别装到5支试管中，加棉塞并包扎成5捆。
③将试管放到1个大烧杯中，在酒精灯上加热煮沸10min灭菌，待温度冷却到50℃，将试管搁置斜面。
④在无菌条件下，往5组试管中接种等量的菌种。
⑤25℃~28℃恒温箱中培养24h。
⑥测定每支试管中培养基的质量，记录并统计分析结果。
(1)上述步骤中有5处明显错误，请找出并加以改正。
(2)若按改正后的实验步骤，请将预测的结果用曲线图表示走势。

(1)①中缓冲液调的pH范围不对。多数细菌的最适pH在6.5～7.5之间，所以应将缓冲液分别调pH为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0。
②中试管包扎成捆后没有做标记，这样就分不清培养基的不同。应该在每捆试管外贴上注明pH的标签。
③中培养基灭茵的方法不对。培养基应在100kPa、121℃的高压蒸汽灭菌锅中灭菌15min～30min。
⑤中培养温度和时间不对，细茵应在30℃～37℃条件下培养1d～2d。
⑥中不应测培养基的质量，应测微生物的数目或菌体的质量。

练习册系列答案

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为了测定某种分解纤维素的微生物生长所需要的最适pH，某同学设计了下列实验步骤：

①配制适宜的培养基，分别装到锥形瓶中，用缓冲液分别调pH为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，并分别标号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。　②将每瓶培养基等量分别装到5支试管中，加棉塞并包扎成5捆。　③将试管放到1个大烧杯中，在酒精灯上加热煮沸10 min灭菌，待温度冷却到50℃，将试管搁置斜面。　④在无菌条件下，往5组试管中接种等量的菌种。⑤25～28℃恒温箱中培养24 h。⑥测定每支试管中培养基的重量，记录并统计分析结果。

（1）上述步骤中有5处明显错误，请找出并加以改正。

（2）若按改正后的实验步骤，请将预测结果用曲线图表示走势。

（每空1分，共6分）如图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题：

(1) 要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明
__________________________________________________________。
(2) 接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用
______________法。
(3) 用稀释涂布平板法统计菌落数目时，最好选择菌落数在___________间的平板进行计
数。若统计出在一稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为
0.2 mL，则每克样品中的菌落数为___________________。
(4) 在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入___________________指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现____________。

（12分）如图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题：

(1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明________________________________________________________________________。
(2)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用_______________法。
(3)用稀释涂布平板法统计菌落数目时，最好选择菌落数在___________间的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2 mL，则每克样品中的菌落数为__________________________________。
(4)在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入___________________指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现____________

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。　请分析回答下列问题：

71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

①最好选择环境采集土样。

②配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行，接种前要进行。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是。

③以下是两种培养基配方：

A培养基配方：

KH₂P0₄	Na₂HP0₄	MgS0₄.7H₂0	纤维素酶	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1g	10.0g	1.0g	15.og

B培养基配方：

KH₂P0₄	NaN0₃	Na₂HP0₄.7H₂0	MgS0₄.7H₂0	KCl	纤维素粉	酵母膏	水解酪素
0．9g	lg	1．2g	0．5g	0．5g	5g	0．5g	0．5g

如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择 (填编号) 培养基配方，从功能看该培养基属于培养基。

④为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用　　法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生　的菌落作为菌种进行扩大培养。

72、进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用酶固定化技术，其具体方法包括如下图所示的三种，则①表示、②表示、③表示载体结合法。

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