Question

【题目】炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病，而噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。对炭疽病疑似患者，可通过图1所示鉴定炭疸杆菌的实验进行确诊，回答下列问题：

（1）微生物生长所需的营养物质有水、无机盐、________。为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后取0.1 mL滴于培养基表面，用无菌_____________涂匀，这种接种方法称为涂布平板法。

（2）制备图1中的液体培养基时采取高压蒸汽灭菌法灭菌，锅内水加热煮沸后，必须 ___________，以保证灭菌温度达到121℃。灭菌的目的是_____________。

（3）图2中接种工具的名称是________，灼烧后必须先将接种工具冷却的原因是____________________。

（4）据图1分析，接种可疑菌后，经35 ℃培养24小时，液体培养基变浑浊，对照组试管中应加入________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组______________（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。原理是实验组中_____，溶液变澄清。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、(和生长因子) 涂布器(玻璃刮铲) 将锅内冷空气彻底排除 杀死全部微生物，包括芽孢和孢子 接种环 避免高温杀死接种物 等量生理盐水 低 噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡

【解析】

①为微生物的生长繁殖提供营养基质的是培养基；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源和氮源，此外培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的需求。②纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是指通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液用涂布器(玻璃刮铲)分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。③获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。④依题意和分析图1可知：该实验的自变量为是否加入噬菌体。该实验的原理是：加入的噬菌体能够特异性地侵染炭疽杆菌，导致炭疽杆菌裂解死亡，使溶液变澄清。⑤图2中的接种工具是接种环。

(1) 微生物生长所需的营养物质有水、无机盐、碳源、氮源、(和生长因子)。采用涂布平板法接种微生物时使用的接种工具为涂布器(玻璃刮铲)。

(2) 用高压蒸汽灭菌法对液体培养基进行灭菌时，锅内水加热煮沸后，必须将锅内冷空气彻底排除，以保证灭菌温度达到121℃。灭菌的目的是杀死全部微生物，包括芽孢和孢子。

(3) 图2中的接种工具是接种环。为了避免高温杀死接种物，对于灼烧后的接种环，必须先将其冷却后才能用于划线操作。

(4) 接种可疑菌后，该菌大量繁殖，导致培养液变浑浊。图1显示：实验组加入的是用生理盐水配制的澄清噬菌体液，据此可推知：对照组试管中应加入等量生理盐水。加入的噬菌体能够特异性地侵染炭疽杆菌，若该患者被炭疽杆菌感染，则培养液中的炭疽杆菌会因裂解死亡而使其数量下降，进而降低培养液的浑浊度，所以若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此实验的原理是：实验组中加入的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清。