Question

2．如图表示转基因烟草的培育过程．请据图回答：
（1）图示过程中将外源基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，该过程用到的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶．
（3）图示过程中用到的植物细胞工程技术是植物组织培养，这一技术的原理是离体的植物细胞具有全能性．
（4）最后通过抗原-抗体杂交技术检测外源基因在烟草体内是否翻译出了对应的蛋白质．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，该过程中首先要用限制酶切割含有目的基因的运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（3）将转基因植物细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术，其原理是植物细胞具有全能性．
（4）检测目的基因是否翻译形成蛋白质需要采用抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）农杆菌转化法
（2）基因表达载体的构建       限制性核酸内切酶（限制酶）    DNA连接酶
（3）植物组织培养    具有全能性 
（4）抗原-抗体杂交

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．