题目内容
红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。目前临床使用的是重组人红细胞生成素(rhEPO),其简易生产流程如图7-16-3所示。请回答问题:
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图7-16-3
(1)图中①所指的物质是________,②所指的物质是________。
(2)基因表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)最常采用的方法是____________,它的启动子是__________的识别和结合部位。
(3)CHO是仓鼠的卵巢细胞经过细胞培养过程中的____________________培养获得的无限增殖细胞。重组CHO细胞培养需要____________的环境,及营养、温度、pH和气体环境适宜的条件。
(4)检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。单克隆抗体的优点是____________________,并可大量制备,它是由小鼠的骨髓瘤细胞与其特定B淋巴细胞通过____________技术获得的杂交瘤细胞分泌的。
(1)mRNA rhEPO
(2)显微注射法 RNA聚合酶
(3)原代培养和传代 无菌、无毒
(4)特异性强、灵敏度高 动物细胞融合
【解析】(1)①是由人胚胎干细胞中提取出来,并能通过反转录形成cDNA,最后通过筛选获得人红细胞生成素(rhEPO)的基因,进行反转录的模板是mRNA,故①为mRNA,②为rhEPO。
(2)将重组DNA分子导入到动物细胞中最常用的方法是显微注射法,启动子和终止子在DNA上,在遗传信息转录时起调控作用,即启动子是RNA聚合酶的识别和结合部位。
(3)重组CHO细胞来自经检测、筛选后的中国仓鼠卵巢细胞系中,细胞系是指当细胞经原代培养后细胞传到50代以后的部分细胞,这些细胞的遗传物质发生了改变,并且带有癌变的特点,从而有可能在适宜的培养条件下无限制地传代下去。细胞培养过程始终都处于无菌、无毒环境,并且还需要适宜的温度、pH和全营养培养基。
(4)与常规抗体相比,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的优点。用于大量生产单克隆抗体的细胞是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞。