Question

14．回答下列有关生物技术实践的问题．
（1）PCR的反应过程包括变性、复性和延伸三步．整个PCR反应过程中需要适宜的温度和酸碱度，前者由PCR仪自动控制，后者需靠缓冲液来维持．
（2）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和碳源．除此之外，培养基还必须含有基本成分是水和无机盐．对培养基进行灭菌，应该采用的方法是高压蒸汽灭菌．
（3）某同学尝试微生物接种的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示．该同学的接种方法是稀释涂布平板法；推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀．

Answer 1

分析 1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）原理：DNA复制．
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．
2、稀释涂布法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养．在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落．

解答 解：（1）PCR的反应过程包括变性、复性和延伸三步．整个PCR反应过程中需要适宜的温度和酸碱度，前者由PCR仪自动控制，后者需靠缓冲液来维持．
（2）培养基的营养成分一般包括水、无机盐、碳源和氮源，如培养基中的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和碳源．对培养基进行灭菌，应该采用高压蒸汽灭菌法．
（3）由图可知，该同学的接种方法是稀释涂布平板法；图中菌落分布不均匀，由此推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
故答案为：
（1）变性、复性和延伸     缓冲液
（2）氮源    碳源    水     无机盐     高压蒸汽灭菌
（3）稀释涂布平板法    涂布不均匀

点评 本图结合图解，考查PCR技术、微生物的分离和培养等知识，要求考生识记PCR技术的原理、条件及过程等基础知识；识记培养基的成分及接种微生物的方法，能根据图中信息准确答题．