Question

10．饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用？若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等？以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图？请分析作答？

（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质．
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌；接种后须将培养皿呈倒置状态放置．
（3）接种以前要进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成单个菌落．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，进行统计后就能大致推测出样品中的活菌数．通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值．若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是C×10⁶．
（4）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是接种环；接种时，在第一区域划线后须将该工具灼烧、冷却后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种．
（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．实验结果显示A～E五种菌株中，E是产植酸酶最理想的菌株．

Answer 1

分析 1、稀释平板法在培养基上分离、培养出微生物的单个菌落，以便于计数、移植、分离，从而达到纯培养的目的．
2、选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长．由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．
3、在微生物实验操作中，防止杂菌污染时贯穿实验整个过程中．

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株需要使用含植酸钙的选择培养基，培养基中应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质?
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌处理，接种后需要将培养皿倒置培养．
（3）接种以前要进行的一系列操作，即稀释平板法培养出微生物的单个菌落，达到纯培养的目的．采用稀释涂布平板法进行微生物的计数时需要至少3个平板统计平板上的菌落数取其平均值．最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C则1g土壤中含有活菌数为C×10×10³×10²═C×10⁶?
（4）题干中的接种过程中用到的接种工具是接种环．接种时，在第一区域划线后须将接种环灼烧、冷却后再划线．
（5）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域．根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．故图中E是产植酸酶最理想的菌株?
故答案为：
（1）植酸钙
（2）灭菌     倒置
（3）单个菌落    3     C×10⁶
（4）接种环       灼烧、冷却
（5）E

点评 本题综合微生物的培养及实验设计和分析能力，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，对实验现象和结果进行解释、分析、处理．