题目内容
【题目】Rag2基因（核基因重组激活基因）缺失的小鼠不能产生成熟的淋巴细胞，从而导致先天性免疫缺陷．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行如下图所示的基因治疗．其技术流程如图： 
（1）动物细胞培养时培养箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是 ． 培养过程中应定期更换培养液，以便 ， 防止其积累对细胞造成危害．
（2）进行核移植的供体细胞一般用培养10代以内的细胞，其原因是10代以内的细胞 ．
（3）进行步骤①时，卵母细胞需发育到期；步骤②中，重组胚胎培养到期时，可从其分离出ES细胞，在此之后的发育过程中，还可以从中分离出ES细胞．
（4）选用Rag2基因缺失小鼠自身的体细胞经过如上图流程获得的造血干细胞对小鼠进行治疗，其好处是可以避免 ．
【答案】
（1）维持培养液的pH；去除代谢产物
（2）能保持正常的二倍体核型
（3）MⅡ中；囊胚；内细胞团；原始性腺
（4）免疫排斥反应
【解析】解：（1.）动物细胞培养时培养箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是维持培养液的pH．培养过程中应定期更换培养液，以便去除代谢产物，防止其积累对细胞造成危害．
（2.）进行核移植的供体细胞一般用培养10代以内的细胞，其原因是10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型．
（3.）进行步骤①时，卵母细胞需发育到MⅡ中期；步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞，在此之后的发育过程中，还可以从原始性腺中分离出ES细胞．
（4.）选用Rag2基因缺失小鼠自身的体细胞经过如上图流程获得的造血干细胞对小鼠进行治疗，其好处是可以避免免疫排斥反应．
【考点精析】根据题目的已知条件，利用动物细胞与组织培养过程的相关知识可以得到问题的答案，需要掌握取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
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