Question

18．RU 图为培育绿色荧光蛋白转基因克隆猪的示意图．请回答下列问题：
（1）为了扩增成功导入重组质粒的猪胎儿成纤维细胞，通常将其悬液放入培养皿或松盖培养瓶中置于恒温箱中进行培养．
（2）核移植时，将处于减数第二次分裂中期（时期）的猪卵母细胞去核．成功植入核后，需用物理法和化学法方法激活重组细胞．
（3）成功激活的重组细胞应在合成培养液培养液中培养，最迟培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植．
（4）重组细胞培养至一定阶段可通过胚胎分割方法一次获得多个胚胎，胚胎移植前，需对 受体母猪进行同情发情处理，胚胎移植后，需对受体母猪进行妊娠的检查．

Answer 1

分析 1、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术．来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一．
2、胚胎移植--是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．胚胎移植简单概括为早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查．

解答 解：（1）在动物细胞培养过程中，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO₂的混合气体的培养箱中进行培养．
（2）选取处在MⅡ中（减数第二次分裂中）期的去核卵母细胞作为受体细胞；通过物理方法电脉冲（或电刺激）或化学方法激活重组细胞，使其完成减数分裂和发育进程．
（3）成功激活的重组细胞应在含糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质的合成培养液中培养，在体外培养至桑葚胚或囊胚阶段后进行胚胎移植．
（4）胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割，经移植获得同卵双胚或多胚．胚胎移植前，首先要对受体母猪进行同情发情处理，以保证其生殖器官的生理环境适合胚胎发育．胚胎移植后需对受体母羊进行妊娠检查．
故答案为：
（1）培养箱
（2）减数第二次分裂中期    物理法和化学法
（3）合成培养液     桑葚胚或囊胚
（4）胚胎分割     同情发情      妊娠

点评 本题考查了胚胎工程的有关知识，要求考生能够识记动物细胞培养的条件，识记胚胎移植的基本程序及生理学基础，能结合所学的知识准确答题．