题目内容
【题目】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：
（1）②中培养目的菌株的选择培养基中应加入_______作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基_____（A.影响；B.不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用_____________法。
（2）④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于_____________；使用_____________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时平板倒置原因是_____________。
（3）若要比较不同菌株降解苯酚能力，简要的思路是__________________________。
（4）实验过程中如何防止其它微生物的污染？_____________。（至少达答两点）
【答案】 苯酚 A 平板菌落计数(活菌计数或菌落计数) ④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基加入苯酚作为碳源 平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离) 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长 用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量 培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作等
【解析】【试题分析】
本题综合考查微生物的培养及实验设计和分析能力。从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。题目中所筛选的细菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚为唯一碳源的选择培养基筛选，含除苯酚外其他碳源的培养基作为对照。严格灭菌、无菌操作可有效防止实验过程中的杂菌污染。
（1）②中的选择培养基中应加入苯酚作为碳源，以增大降解苯酚细菌的浓度；②中不同浓度的碳源影响（A）细菌数量，可用平板菌落计数法来测定②中活菌数目。
（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基中加入苯酚作为碳源；使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落；采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以避免培养过程产生的水分影响微生物的生长。
（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量，可比较不同菌株降解苯酚的能力。
（4）实验过程中要防止其它微生物的污染，应该做到从制备培养基到接种与培养等全部实验过程都无菌操作，如培养基灭菌、接种环境灭菌、接种过程无菌操作等。
培优好卷单元加期末卷系列答案
